詳細(xì)內(nèi)容
產(chǎn)品名稱:維生素C檢測(cè)試劑盒(磷鉬酸微板法)
規(guī)格:50T/100T
供應(yīng)商:遠(yuǎn)慕生物
分類:生化檢測(cè)
儲(chǔ)存方式:4℃,避光,12個(gè)月
產(chǎn)品用途:定量檢測(cè)血清、血漿、動(dòng)植物組織等樣品中的維生素C(抗壞血酸)含量
注意事項(xiàng):在強(qiáng)酸和偏磷酸的根離子存在條件下,鉬酸銨能與維生素C反應(yīng)藍(lán)色化合物,在一定濃度范圍(樣品濃度控制在25~250μg/ml),吸光度值與濃度呈線性關(guān)系,在505nm處檢測(cè)吸光度,通過(guò)檢查標(biāo)準(zhǔn)曲線,獲得Vitamin C含量。
試劑注意事項(xiàng):
①試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
②實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
③使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
④加入試劑的順序一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
⑤按說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
維生素C檢測(cè)試劑盒(磷鉬酸微板法) 常見問(wèn)題以及解決方法:
1、試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍;
2、加樣中可能遇到的問(wèn)題:在做血清或是血漿用于檢測(cè)試劑的時(shí)候,會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況,這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí),然后在進(jìn)行離心處理;
3、洗板時(shí)容易造成誤差: 因?yàn)橄窗迨侨斯は吹,所以判斷什么時(shí)候洗干凈了也是人為判斷的,這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng);
4、顯色問(wèn)題: 使用了過(guò)期的顯色劑或者是顯色劑用過(guò)后放置時(shí)間太長(zhǎng),都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進(jìn)行顯色反應(yīng)的時(shí)候,要先查看顯色劑本身的情況;
5、終止反應(yīng):在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽(yáng)性結(jié)果。所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒;
6、讀板:讀板的時(shí)候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈;
7、嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作。
維生素C檢測(cè)試劑盒(磷鉬酸微板法) 操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50?l。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40?l,然后再加待測(cè)樣品 10?l。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50?l,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50?l,再加入顯色劑 B50?l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50?l,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
檢測(cè)試劑注意事項(xiàng):
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見盒內(nèi)標(biāo)示。
特點(diǎn):
1.專一性強(qiáng)?乖c抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測(cè)的對(duì)象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測(cè)的靈敏性,使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過(guò)酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
4.結(jié)果易觀察。對(duì)檢測(cè)結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測(cè)定,還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測(cè)物的顯示。
5.可以定量測(cè)定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測(cè)定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測(cè)定。
6.可以大規(guī)模測(cè)定樣品。如有成千上萬(wàn)份樣品需要進(jìn)行檢測(cè),免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。
7.
儀器和試劑簡(jiǎn)單。對(duì)免疫沒技術(shù)來(lái)說(shuō),不需要熒光顯微鏡,也不需要測(cè)定放射性的特殊
儀器,所用
儀器及試劑均屬一般性
儀器與試劑,普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購(gòu)置.
原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
標(biāo)簽:
維生素C檢測(cè)試劑盒(磷鉬酸微板法) 檢測(cè)試劑盒
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