詳細(xì)內(nèi)容
產(chǎn)品名稱：堿性磷酸酶同工酶檢測(cè)試劑盒(抑制敏感法)
規(guī)格：50T/100T
供應(yīng)商:遠(yuǎn)慕生物
分類：酶類檢測(cè)
儲(chǔ)存方式：—20℃,避光,12個(gè)月
產(chǎn)品用途：檢測(cè)細(xì)胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿、血清等樣品中內(nèi)源性的堿性磷酸酶活性。
注意事項(xiàng)：采用酚比色法,其檢測(cè)原理是磷酸苯二鈉在堿性條件下,可在堿性磷酸酶的作用下生成游離酚和磷酸。在堿性條件下酚與氨基安替比林結(jié)合,并經(jīng)氧化生成紅色醌式結(jié)構(gòu)物,呈深淺不一的紅色,產(chǎn)物紅色越深,說(shuō)明酸性磷酸酶活性越高,反之則酶活性越低,通過(guò)分光光度比色法測(cè)定505～525nm處吸光度
試劑注意事項(xiàng)：
①試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
②實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
③使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
④加入試劑的順序一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
⑤按說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
堿性磷酸酶同工酶檢測(cè)試劑盒(抑制敏感法) 常見(jiàn)問(wèn)題以及解決方法：
1、試劑的選擇：選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的，但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍；
2、加樣中可能遇到的問(wèn)題：在做血清或是血漿用于檢測(cè)試劑的時(shí)候，會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況，這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí)，然后在進(jìn)行離心處理；
3、洗板時(shí)容易造成誤差： 因?yàn)橄窗迨侨斯は吹�，所以判斷什么時(shí)候洗干凈了也是人為判斷的，這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩，所以多清洗幾次，還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng)；
4、顯色問(wèn)題： 使用了過(guò)期的顯色劑或者是顯色劑用過(guò)后放置時(shí)間太長(zhǎng)，都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進(jìn)行顯色反應(yīng)的時(shí)候，要先查看顯色劑本身的情況；
5、終止反應(yīng)：在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快，差生氣泡，造成假陽(yáng)性結(jié)果。所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒；
6、讀板：讀板的時(shí)候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈；
7、嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作。
堿性磷酸酶同工酶檢測(cè)試劑盒(抑制敏感法) 操作步驟：
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50?l。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40?l，然后再加待測(cè)樣品 10?l。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50?l，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50?l，再加入顯色劑 B50?l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50?l，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
檢測(cè)試劑注意事項(xiàng)：
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2． 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，
3． 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4． 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本-20℃保存，避免反復(fù)凍融。
6． 在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低精確度，造成吸光度偏離的假像。
7． 加樣完畢后，應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條，以便使孔中的液體充分混勻。
8． 試劑盒保存于2～8℃，請(qǐng)勿冷凍，有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
特點(diǎn)：
1.專一性強(qiáng)。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng)，而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，所檢測(cè)的對(duì)象是抗原（或抗體），使用的抗體除標(biāo)記了酶以外，與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應(yīng)，顯示抗原與抗體的結(jié)合，大大提高了檢測(cè)的靈敏性，使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過(guò)酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。
4.結(jié)果易觀察。對(duì)檢測(cè)結(jié)果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測(cè)定，還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測(cè)物的顯示。
5.可以定量測(cè)定。溶液中的抗原物質(zhì)，應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測(cè)定，依據(jù)光密度值的變化，可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測(cè)定。
6.可以大規(guī)模測(cè)定樣品。如有成千上萬(wàn)份樣品需要進(jìn)行檢測(cè)，免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。
7.
儀器和試劑簡(jiǎn)單。對(duì)免疫沒(méi)技術(shù)來(lái)說(shuō)，不需要熒光顯微鏡，也不需要測(cè)定放射性的特殊
儀器，所用
儀器及試劑均屬一般性
儀器與試劑，普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購(gòu)置.
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
標(biāo)簽：
堿性磷酸酶同工酶檢測(cè)試劑盒(抑制敏感法) 檢測(cè)試劑盒
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