pCAMBIA1302載體用途說(shuō)明書(shū)
點(diǎn)擊次數(shù):809 發(fā)布時(shí)間:2017/12/13
公司名稱:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
型 號(hào):
生產(chǎn)地址:中國(guó)大陸
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pCAMBIA1302載體用途說(shuō)明書(shū),儲(chǔ)存方式: 4℃,室溫保存
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產(chǎn)品名稱:pCAMBIA1302載體
供應(yīng)商:遠(yuǎn)慕
產(chǎn)地:國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
產(chǎn)品類別:分子 分子克隆
產(chǎn)品規(guī)格:40ul,0.5μg/μl
產(chǎn)品單位:支
儲(chǔ)存方式: 4℃,室溫保存
通過(guò)RNAi策略轉(zhuǎn)化小麥,以降低小麥種子中直鏈淀粉的含量。小麥中直鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶是顆粒結(jié)合型淀粉合成酶(Granule—bound starch synthase l,GBSSI,即WAXY蛋白),通過(guò)RT—PCR方法從小麥種子中分離出Waxy基因。Southern雜交分析表明,在基因組中存在3個(gè)Waxy基因。Northern雜交分析顯示出在授粉后的小麥種子中檢測(cè)到Waxy mRNA。利用RNA沉默策略,將Waxy編碼區(qū)683bp的正向和反向片段以及150bp內(nèi)含子,連接于表達(dá)載體pCAMBIA3300中玉米u(yù)bil啟動(dòng)子下游。以揚(yáng)麥10號(hào)授粉后15d的幼胚為外植體,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法進(jìn)行轉(zhuǎn)化。通過(guò)PCR、RT-PCR和葉片離體褪綠實(shí)驗(yàn)鑒定出4株轉(zhuǎn)基因植株。小麥胚乳I2-KI染色和直鏈淀粉含量測(cè)定表明這4株轉(zhuǎn)基因植株直鏈淀粉含量明顯下降。研究結(jié)果表明Waxy基因的RNA沉默使轉(zhuǎn)基因小麥種子直鏈淀粉的含量下降。
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