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動物血清的區(qū)分比較與作用
閱讀次數(shù):445 發(fā)布時間:2023/7/12 9:34:06
血清主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用。由于血清來源于動物,且含有細胞培養(yǎng)中所需的各種營養(yǎng)(血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等),這奠定了血清是細胞培養(yǎng)實驗中普遍的試劑的基礎(chǔ)。 市面上的牛血清產(chǎn)品名稱雖然五花八門,但根據(jù)其不同的特性,追其根本,但大致可分為以下四種。 根據(jù)牛的取血年齡可以區(qū)分: 胎牛血清( Foetal Bovine Serum ,簡稱 FBS ) 指的是取自未出生,母牛剖腹心臟穿刺采血得來的血清。 國產(chǎn)胎牛血清(并無明確定義,但通常用此命名) 指的是出生 4-6 小時,且未進行哺乳( unsuckled )進食的新生牛,有時還稱作國產(chǎn)新生牛血清。 適用于常規(guī)細胞培養(yǎng)、細胞株保存和單抗研制等方面。 新生牛血清( Newborn Calf Serum ,簡稱 NBCS ,或稱小牛血清) 指的是出生 14 天 -3 個月進行取血的牛血清。適用于培養(yǎng)或?qū)Νh(huán)境要求低的細胞。 成年牛血清( Adult Bovine Serum ,簡稱 ABS ) 指的是取血時牛齡通常超過 12 個月的牛血清。適用于多種動物體外培養(yǎng),包括:克隆細胞、單層細胞、懸浮細胞等。 以上取血牛齡的差異主要是受當(dāng)?shù)貒倚竽翗I(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響,因為牛血多為畜牧業(yè)副產(chǎn)業(yè),并未有門為取血而養(yǎng)的牛。 幾種血清的比較: 提取血清體積 / 只牛: 成年牛血清 (5-8L) > 小牛血清 (2L) > 國產(chǎn)胎牛血清 (1L) > 胎牛血清 (0.5L) 培養(yǎng)細胞的效果: 胎牛血清 > 國產(chǎn)胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清 價格:胎牛血清 > 國產(chǎn)胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清 這幾種不同牛齡血清所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。常規(guī)來說,年齡越小的牛血清,細胞培養(yǎng)效果越好。胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛,且因為胎牛未進食過母乳,所以 IgG 含量低。故目多數(shù)實驗人員選擇的都是胎牛血清進行細胞培養(yǎng)。 胎牛血清根據(jù)實驗要求的不同又進行了特殊加工工藝加工,那么在這么多種類的血清面,要怎么選擇適合自己細胞培養(yǎng)的那一款呢? 根據(jù)加工工藝的不同進行區(qū)分: 去外泌體血清 去除 ≥ 99% 的胎牛血清內(nèi)源外泌體,并與處理的胎牛血清具有相同的細胞生長速率和形態(tài)。適用于收集細胞分泌的外泌體時使用。 透析血清 分子量小于 10,000 的分子如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白均被移除。透析血清主要用在進行營養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)定特定成分進行研究的實驗中。 碳吸附血清 使用活性和右旋糖苷去除血清中的親脂類 (lipophilic) 物質(zhì),如某些激素、細胞因子、生長因子等,去除作用對分子量大小并無區(qū)分。碳吸附胎牛血清常用于體外培養(yǎng)研究驗證激素的作用效果。 低 IgG 血清 用于研究抗體 、病毒和病毒反應(yīng)、細胞表面抗原表位。 四環(huán)素調(diào)控胎牛血清 應(yīng)用于使用敏感四環(huán)素誘導(dǎo)表達系統(tǒng)的細胞培養(yǎng) (Tet-on, Tet-off) ,以及其它對四環(huán)素敏感的實驗中。 HI ( 熱滅活 ) 處理血清 血清熱滅活是通過提高血清溫度到 56 ℃,并保持該溫度 30Min 完成 , 可以去除血清內(nèi)補體,確保細胞與抗體結(jié)合不會發(fā)生裂解。加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學(xué)研究中培養(yǎng) ES 細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。 胚胎干細胞( ES )用血清 是從多個批次的胎牛血清經(jīng)過細胞培養(yǎng)及其他測試篩選出特定批號,適用于人及小鼠胚胎干細胞、成體干細胞及原代細胞長期培養(yǎng)。 間充質(zhì)干細胞( MSC )用血清 從多個批次的胎牛血清篩選出特定批號,經(jīng)過骨髓,脂肪組織及臍帶來源的間充質(zhì)干細胞的細胞活性嚴格測試,通過傳代及分化比例測試。 根據(jù)血清來源物種進行區(qū)分: 馬血清 10% 馬血清可代替 FBS 用于支持 SRBC 的體外抗體應(yīng)答 , 常與牛血清結(jié)合或單獨作為哺乳動物細胞培養(yǎng)的補充培養(yǎng)基。 豬血清 豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細胞培養(yǎng) , 疫苗生產(chǎn)(生產(chǎn)支原體) , 中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒( AAV ) , 用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化 , 作為酶聯(lián)免疫吸附試驗( ELISA )中的標(biāo)準(zhǔn)陰性參考。 兔血清 正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對照。在免疫組織化學(xué)和免疫細胞化學(xué)方面,各種研究均采用 20% 或 1:200 稀釋兔血清作為阻斷劑。 羊血清 用于生物醫(yī)學(xué)研究的大多數(shù)細胞系和原代培養(yǎng)物上, FBS 的合適替代物,病毒分離和鑒定,病毒學(xué)研究。 用作魚類細胞培養(yǎng)的有效 NBCS 替代物。 可成功地代替胎牛血清在生長培養(yǎng)基中長期用于環(huán)孢蘑菇的體外繁殖。 雞血清 適用于單抗研制、規(guī);囵B(yǎng)的疫苗生產(chǎn)、生物醫(yī)學(xué)研究和診斷試劑生產(chǎn)。 驢血清 適用于單抗研制、免疫組化、規(guī);囵B(yǎng)的疫苗生產(chǎn)、生物醫(yī)學(xué)研究和診斷試劑生產(chǎn)。 小鼠血清 小鼠血清采用健康小鼠血液為原料,經(jīng)無菌采集、分離、微孔過濾后而成,性狀為澄清液體,無噬菌體、低內(nèi)毒素,無溶血無異物無細菌真菌支原體霉形體衣原體等,適用于試驗室或生化科研相關(guān)試驗,滿足不同科研實驗的多種需求。 我司長期供應(yīng)各類動物血清: ①動物血清系列: 胎牛血清,特新生牛血清,優(yōu)新生牛血清,標(biāo)準(zhǔn)新生牛血清,標(biāo)準(zhǔn)馬血清,特馬血清,山羊血清,綿羊血清,兔血清,雞血清,豬血清,大牛血清,小牛血清,狗血清,驢血清,大鼠血清,小鼠血清,豚鼠血清,巴比西鼠血清。 ②血漿系列: 胎牛血漿,新生牛血漿,大牛血漿,小牛血漿,兔血漿,馬血漿,山羊血漿,綿羊血漿,雞血漿,豬血漿,狗血漿,驢血漿,大鼠血漿,小鼠血漿,豚鼠血漿。 ③脫纖維全血系列(玻璃瓶和 Pet 塑料瓶): 新生牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血,兔血,兔紅細胞( 20% ),綿羊紅細胞( 20% ),雞紅細胞( 20% ),兔紅細胞( 4% ),綿羊紅細胞 4% ,雞紅細胞( 4% )。 ④抗凝全血系列: 新生牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血 ⑤裂解全血(脫纖維裂解,抗凝裂解) 脫纖維裂解血:小牛血,大牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血 抗凝裂解血:小牛血,大牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血
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