血液瓊脂培養(yǎng)基的制備實(shí)驗(yàn)
閱讀次數(shù)：361 發(fā)布時間：2023/3/30 11:18:01
實(shí)驗(yàn)方法原理 血液培養(yǎng)基是一種含有脫纖維動物血（一般用兔血或羊血）的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，因此除培養(yǎng)細(xì)菌所需要的各種營養(yǎng)外，還能提供輔酶（如V因子），血紅素（X因子)等特殊生長因子。 因此血液培養(yǎng)基常用于培養(yǎng)，分離和保存對營養(yǎng)要求苛刻的某些病原微生物。此外，這種培養(yǎng)基還可用來測定細(xì)菌的溶血作用。
實(shí)驗(yàn)材料 兔羊
試劑、試劑盒 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基
儀器、耗材 三角瓶平皿注射器
實(shí)驗(yàn)步驟
一、血液培養(yǎng)基配方
二、器材
1. 培養(yǎng)基
牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。
2. 儀器或其他用具
裝有5~10粒玻璃珠的無菌三角瓶，無菌注射器，無血平皿等。
3. 動物
健康的兔或羊。
三、操作步驟
牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基的制備（見實(shí)驗(yàn)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基）。
2. 無菌脫纖維兔血（或羊血）的制備
用配備18號針頭的注射器以無菌操作抽取全血（無菌采血操作見實(shí)驗(yàn)動物的注射），并立即注人裝有無菌玻璃珠（約3 mm）的無菌三角瓶中，然后搖動三角瓶10 min左右，形成的纖維蛋白塊會沉淀在玻璃珠上，把含血細(xì)胞和血清的上清液傾人無菌容器即得到脫纖維兔血（或羊血）置冰箱備用。
整個過程必須嚴(yán)格無菌操作，制備脫纖維血液時，應(yīng)搖動足夠時間以防凝固。
3. 將牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基溶化，待冷至45 ℃時，以無菌操作按10%加人無菌脫纖維兔血（或羊血）于培養(yǎng)基中，立即搖蕩，以便血液和培養(yǎng)基充分混勻。
35-45℃時加入血液是為了保存其中某些不耐熱的營養(yǎng)物質(zhì)和保存血細(xì)胞的完整，以便于觀察細(xì)菌的溶血作用。同時，在這種溫度時瓊脂不會凝固。
4. 迅速以無菌操作倒入無菌平皿中，使成血液瓊脂平板。注意不要產(chǎn)生氣泡。
5. 置37℃過夜，如無菌生長即可使用。
客服一
