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遠(yuǎn)慕生物:核酸檢測(cè)試劑原材料一覽!
閱讀次數(shù):450 發(fā)布時(shí)間:2022/11/15 11:09:38
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  核酸檢測(cè)試劑是基于核酸擴(kuò)增檢測(cè)技術(shù)的體外診斷試劑,包括等溫?cái)U(kuò)增、PCR,qPCR等,F(xiàn)在有些實(shí)驗(yàn)室自己合成引物探針,生產(chǎn)qPCR診斷試劑,也有些試劑生產(chǎn)企業(yè)在問(wèn)如何保證試劑生產(chǎn)過(guò)程的質(zhì)量控制。

檢測(cè)試劑的生產(chǎn)質(zhì)控與診斷試劑的評(píng)價(jià)既有相同點(diǎn),因?yàn)槎际腔谙嗤脑u(píng)價(jià)指標(biāo);又有不同點(diǎn),生產(chǎn)過(guò)程會(huì)關(guān)注原料、半成品、成品,診斷試劑評(píng)價(jià)只針對(duì)成品。
核酸檢測(cè)試劑原材料有如下這些:

1、dNTP

脫氧三磷酸核苷,核酸的組成成分,包括:dATP、dUTP、dGTP、dCTP和dTTP。應(yīng)為HPLC純、PCR,無(wú)DNase和RNase污染。-20℃保存。

2、引物

由一定數(shù)量的核苷酸構(gòu)成的特定序列,通常采用DNA合成儀人工合成,合成后經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳或其他適宜方法純化。凍干粉,1800D以上。序列正確。純度應(yīng)達(dá)到電泳(PAGE)或HPLC,不含雜帶。應(yīng)提供合成機(jī)構(gòu)出具的合成產(chǎn)物的質(zhì)檢證明,如PAGE電泳結(jié)果或HPLC分析圖譜。應(yīng)作HPLC分析和紫外光吸收分析。以紫外分光光度計(jì)測(cè)定OD260nm/OD280nm的比值在1、6~2、0之間,可視為合格引物。-20℃保存。

3、探針

是指特定的帶有示蹤物(標(biāo)記物)的已知核酸片段(寡聚核苷酸片段),能與互補(bǔ)核酸序列退火雜交,用于特定核酸序列的探測(cè)。通常采用DNA合成儀人工合成,合成后經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳或其他適宜方法純化,在5-端標(biāo)記熒光素報(bào)告基團(tuán)或其他發(fā)光標(biāo)記物,在3-端標(biāo)記熒光素淬滅基團(tuán),并經(jīng)HPLC或其他適宜方法純化。

4、Taq DNA聚合酶

具有DNA聚合酶活性,無(wú)核酸外切酶活性及核酸內(nèi)切酶活性;具熱穩(wěn)定性,94℃保溫1小時(shí)后仍保持50%活性。-20℃保存。

5、UNG(尿嘧啶糖基化酶)

具有尿嘧啶糖基化酶活性,無(wú)核酸外切酶及核酸內(nèi)切酶活性,IU UNG在 37℃處理3分鐘后,103拷貝以下含U模版應(yīng)完全降解,不能產(chǎn)生擴(kuò)增產(chǎn)物。-20℃保存。

6、RT-PCR酶(反轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增酶)

具逆轉(zhuǎn)錄酶活性和DNA聚合酶活性,無(wú)核酸外切酶及核酸內(nèi)切酶活性;具熱穩(wěn)定性,94℃1小時(shí)后仍保持50%活性,-20℃保存。

好了,以上便是關(guān)于核酸檢測(cè)試劑的相關(guān)內(nèi)容介紹了。
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