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植物基因組DNA 快速提�。�50 次）實驗步驟
閱讀次數(shù)：390 發(fā)布時間：2022/6/8 13:54:00
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植物基因組DNA 快速提取（50 次）
概述：
本方法可用于植物細胞DNA 的快速提取，可提取107 細胞，其質(zhì)量能夠滿足各種分子生物學(xué)要求。
 
組成：
1．溶液A 1.2ml RNase A 10mg/ml。-20℃保存
2．溶液B 60ml
3．溶液C 180ml
4．溶液D 3ml Resin 用時充分混勻
5. 溶液E 50ml 洗液(用加入75ml 無水酒精,充分混勻)
6．溶液F 25ml TE buffer
 
步驟：
1. 組織≤0.1g，液氮研磨，加入0.3ml 溶液B，反復(fù)混勻，室溫5min。
2. 加入0.8ml 溶液C，溶液A 20μl，充分混勻，室溫放置20min。
3. ≥8000rpm 離心3min。
4. 取上清，加入50ul 溶液D，室溫放置5min，≥8000rpm 離心1min，棄上清。
5. 加入800μl 溶液C，混勻，≥8000rpm 離心1min，棄上清。
6. 加入1ml 溶液E，混勻，≥8000rpm 離心30-60s，棄上清。
7. 重復(fù)步驟6。
8. ≥12000rpm,離心30-60s，吸干上清，室溫敞開蓋晾干約5-10min。
9. 取溶液F 200-300μl，混勻，40-50℃水浴3-5min。
10. ≥12000rpm 離心30-60s，取上清，即為DNA。
 
注：
1. 組織若多，可適當(dāng)加大溶液B 和溶液D 的用量，其它成份不變。
2. 混勻一定要溫和，否則DNA 大分子將被打斷，而部分降解。
3. 適用新鮮組織、嫩組織，盡可能去除葉脈、葉柄。
4. 液氮研磨一定要保證組織在研磨過程中形如干粉狀。
5. 用戶可依實驗需要，適當(dāng)調(diào)整溶液F 加入量，溶液F 越少，DNA 濃度越高，但產(chǎn)量略有損失，若想大限度提高產(chǎn)量，可重復(fù)步驟9、10。兩次所得DNA 可合在一處。
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