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收到的細胞脫落了?碎片多?黑點多?
閱讀次數(shù):414 發(fā)布時間:2021/12/13 14:17:10
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科學研究中需要用到各種細胞系作為實驗模型,這些細胞系通常可以從各大細胞庫獲取。而在收到細胞庫寄送來的常溫細胞時,常常會遇到一些問題,比如細胞脫落、皺縮、有黑點。這篇文章將幫助大家解決這些常見問題。



1、收貨時細胞脫落
有些細胞本身貼壁不牢,很容易脫落(如293系列,TM3,TM4,Raw264.7,原代內(nèi)皮細胞,原代平滑肌細胞)。
另外,運輸過程中受到碰撞或氣溫過低,也可能導致細胞脫落。

處理辦法
① 脫落的細胞進行離心收集,并在離心管中消化。
② 仍然貼壁的細胞,按照常規(guī)方法加入胰酶或其他解離劑消化。
③ 再將消化好的脫落細胞和貼壁細胞混合,按比例接種到新的培養(yǎng)器皿中。

2、 收貨時,細胞皺縮
運輸過程中,路途顛簸加上溫度不穩(wěn)定,常溫細胞會發(fā)生回縮。

處理辦法
放入培養(yǎng)箱靜置2-4小時,若4小時后仍然沒有伸展,延長靜置時間。注意,過夜靜置時,需倒出部分培養(yǎng)基,留5-10mL在瓶中,瓶蓋擰松透氣,保持氣體交換(L15培養(yǎng)體系除外)。
若有脫落細胞,需離心收集。

3、收貨時,細胞黑點較多
當受到運輸環(huán)境影響時,細胞會發(fā)生應激反應,分泌活動增加,導致分泌蛋白增多,呈黑色圓球狀,分布無規(guī)律。
同時,路途中凋亡的細胞碎裂后將產(chǎn)生細胞碎片,為黑色或透明色,呈不規(guī)則狀,分布無規(guī)律。
另外,有些細胞本身分泌活動較強,培養(yǎng)時常伴隨黑點。

處理辦法
1.貼壁細胞放培養(yǎng)箱靜置2-4小時后,正常換液或傳代;
2.懸浮細胞800~1000rpm(約160~200g) 低速離心3min去除碎片。通常培養(yǎng)數(shù)天后,細胞狀態(tài)會逐漸穩(wěn)定下來。
小貼士:遇到小黑點問題時,先要排除微生物污染,再按以上辦法解決哦~
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