目，針對(duì)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)有多種技術(shù)方法，那么我們?cè)撊绾闻袛噙x擇哪種方法適合呢？我們需要去了解實(shí)驗(yàn)方法的特性。無非就是用某種特定的刺激物（如細(xì)胞活素）去刺激一些細(xì)胞或組織，讓它們high起來，然后分析細(xì)胞對(duì)這些外源刺激物的反應(yīng)，檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)哪條信號(hào)通路被激活或失活，或者什么
蛋白被分泌出來。每一種實(shí)驗(yàn)方法都有它的特性，下面就以下幾種方法做介紹：
什么時(shí)候用免疫印跡實(shí)驗(yàn)？
免疫印跡實(shí)驗(yàn)（Western Blot，WB）可檢測(cè)信號(hào)通路中某種蛋白質(zhì)的特性、表達(dá)和分布，分析容量大、敏感度高、特異性強(qiáng)。建立蛋白質(zhì)的個(gè)人檔案
但至于蛋白-蛋白相互作用則要用另一種更復(fù)雜的方法，即免疫共沉淀法（Co-immunoprecipitation，Co-IP），它接近細(xì)胞內(nèi)的生理情況，是以成為經(jīng)典方法。
什么時(shí)候用表面等離子體共振？
表面等離子共振（Surface Plasmon Resonance，SPR）除了研究蛋白-蛋白相互作用（例如受體-配體相互作用），還有可研究小分子-蛋白或細(xì)胞-蛋白的相互作用。這種方法不需要標(biāo)記蛋白（熒光標(biāo)記或同位素標(biāo)記），還可以實(shí)時(shí)定量分析這些相互作用的親和力、熱力學(xué)、動(dòng)力學(xué)特性。SPR是分析動(dòng)力學(xué)和親和力的金標(biāo)準(zhǔn)。
什么時(shí)候用電泳遷移率實(shí)驗(yàn)？
電泳遷移率實(shí)驗(yàn)（Electrophoretic Mobility Shift Assay，EMSA）初用于檢測(cè)DNA結(jié)合蛋白與相應(yīng)的DNA序列結(jié)合的情況，可做定性和定量分析，包括細(xì)胞核中的轉(zhuǎn)錄因子（如NF-kB ）的活性等等，現(xiàn)在也常用于研究RNA結(jié)合蛋白和相應(yīng)的RNA序列相互作用。
這些分析用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（EenzymeLinked ImmunosorbentAssay，ELISA）也可以做，原理差不多。
什么時(shí)候用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)？
PCR（Polymerase Chain Reaction）或Real Time PCR可以把特定的DNA序列大幅擴(kuò)增，便于檢測(cè)活性基因的表達(dá)情況。而且PCR用途很廣。
什么時(shí)候用酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定？
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）如果要看看細(xì)胞外如何，比如細(xì)胞培養(yǎng)上清液或體液中的某種蛋白質(zhì)分泌情況，則通常選用ELISA，從而獲知相應(yīng)基因的活性。
客服一
