MS培養(yǎng)基是Murashige和Skoog于1962年為煙草細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)的,其特點(diǎn)是無機(jī)鹽和離子濃度較高,是較穩(wěn)定的離子平衡溶液,它的硝酸鹽含量高,其養(yǎng)分的數(shù)量和比例合適,能滿足植物細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)和生理需要,因而適用范圍比較廣,多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基,也是目使用zui普遍的植物組織培養(yǎng)基。
MS培養(yǎng)基具有較高的無機(jī)鹽濃度,能夠保證組織生長(zhǎng)所需的礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)還能加速愈傷組織的生長(zhǎng)。由于配方中的離子濃度高,在配制、貯存和消毒等過程中,即使有些成分略有出入,也不會(huì)影響離子間的平衡。由于植物的多樣性和生長(zhǎng)環(huán)境的復(fù)雜性和多變性,所以不可能有一種能夠適應(yīng)所有類型的植物組織和器官,滿足所有植物并實(shí)現(xiàn)其培養(yǎng)材料的再生,通常需要根據(jù)材料來源、培養(yǎng)目的等的不同,選擇不同的培養(yǎng)基或者對(duì)培養(yǎng)成分做適當(dāng)?shù)母牧肌?br />
MS培養(yǎng)基是目使用普遍的培養(yǎng)基。其具有較高的無機(jī)鹽濃度,能夠保證組織生長(zhǎng)所需的礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)還能加速愈傷組織的生長(zhǎng)。由于配方中的離子濃度高,在配制、貯存和消毒等過程中,即使有些成分略有出入,也不會(huì)影響離子間的平衡。MS固體培養(yǎng)基可用于誘導(dǎo)愈傷組織,也可用于胚、莖段、莖尖及花藥的培養(yǎng),其液體培養(yǎng)基用于細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)能獲得明顯的成功。MS培養(yǎng)基的無機(jī)養(yǎng)分的數(shù)量和比例比較合適,足以滿足植物細(xì)胞在營(yíng)養(yǎng)上和生理上的需要。因此,一般情況下,不用再添加氨基酸、酪
蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機(jī)附加成分。和其它培養(yǎng)基的基本成分相比,MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量高,這是它的顯著特點(diǎn)。
mg/L工作液濃度 單位
大量元素:
NH4NO3 1650
KNO3 1900
CaCl2·2H2O 440
MgSO4·7H2O 370
KH2PO4 170
微量元素:
KI 0.83
H3BO3 6.2
MnSO4·4H2O 22.3
ZnSO4·7H2O 8.6
Na2MoO4·2H2O 0.25
CuSO4·5H2O 0.025
CoCl2·6H2O 0.025
鐵鹽:
FeSO4·7H2O(27.8)
Na2-EDTA·2H2O(37.3)
有機(jī)物質(zhì):肌醇100
煙酸0.5
鹽酸吡哆醇(維生素B6) 0.5
鹽酸硫胺素(維生素B1) 0.1
甘氨酸2.0
注意:肌醇一般是要另外分開來獨(dú)自配成濃縮液,因?yàn)樗容^難溶,一般配成100倍, 微量元素可以配成1000倍的。
注意事項(xiàng):
1.母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每種母液中的幾種成分稱量完畢后,分別用少量的蒸餾水徹底溶解,然后再將它們混溶,后定容到1 L。
2.母液Ⅲ的配制方法是:將稱好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別放到450 mL蒸餾水中,邊加熱邊不斷攪拌使它們?nèi)芙猓缓髮煞N溶液混合,并將pH調(diào)至5.5,后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。
MS培養(yǎng)基中還需要加入2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6 芐基嘌呤(6BA)等植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì),并且分別配成母液(0 1 mg/mL)。其配制方法是:分別稱取這3種物質(zhì)各10 mg,將2,4-D和NAA用少量(1 mL)無水乙醇預(yù)溶,將6BA用少量(1 mL)的物質(zhì)的量濃度為0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解過程需要水浴加熱,后分別定容至100 mL,即得質(zhì)量濃度為0 1 mg/mL的母液。
4.組織培養(yǎng)是否能夠獲得成功,主要取決于對(duì)培養(yǎng)基的選擇。不同的培養(yǎng)基具有不同的特點(diǎn),也就適合于不同的植物種類和接種材料。在開展組織培養(yǎng)項(xiàng)目時(shí),先要對(duì)各種培養(yǎng)基進(jìn)行了解和分析,以便能從中選擇合適的使用。組培用的培養(yǎng)基一般包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基和激素,但是植物激素的種類和數(shù)量,隨著不同培養(yǎng)階段和不同材料有變化,因此各培養(yǎng)基配方中均不列入植物激素。常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基除了有MS培養(yǎng)基,還有B5培養(yǎng)基,N6培養(yǎng)基。