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冷凝集實驗知識及操作步驟
閱讀次數(shù):577 發(fā)布時間:2021/6/9 10:39:42
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一、概念與臨床意義

冷凝集實驗主要用于由肺炎支原體引起的原發(fā)性非典型性肺炎的輔助診斷。參考值:凝集價≤1:32;臨床意義:由肺炎支原體感染引起的原發(fā)性非典型性肺炎患者的血清中常含有較高的寒冷紅細胞凝集素,簡稱冷凝集素,它能與患者自身紅細胞或“O”型人紅細胞于4℃條件下發(fā)生凝集,在37℃時又呈可逆性完全散開。75%的支原體肺炎病人,于發(fā)病后第二周血清中冷凝集素效價達1:32以上,一次檢查凝集價>1:64或動態(tài)檢查升高4倍以上時,有診斷意義。

二、實驗操作步驟

玻璃試管10支,分別加入生理鹽水200微升,支加入待測血清200微升,混勻后取出200微升加入第二支試管,依次倍比稀釋到第九支試管,取出200微升棄去;同時準(zhǔn)備好2%“O”型紅細胞500微升,操作離心后“O”型紅細胞用生理鹽水洗滌3次,取離心洗滌后的紅細胞100微升加入4.9毫升的生理鹽水中即可。后加入200微升配好的紅細胞到10支試管中,混合后放入4℃冰箱中3小時后判斷凝集現(xiàn)象。

三、冷凝集實驗相關(guān)知識

1、多數(shù)正常人體內(nèi)都有低效價的自身冷凝集素,但效價低,反應(yīng)溫度范圍也小,無臨床意義。

2、有臨床意義的自身冷凝集素一般有高效價和反應(yīng)溫度范圍高的特點,可致自身免疫性溶血,如CAS.它的發(fā)生可能是急性或慢性的。急性常繼發(fā)于淋巴組織增生如淋巴瘤或肺炎支原體感染;慢性的常在老年人中發(fā)生。天氣冷時可發(fā)生雷諾現(xiàn)象和血紅蛋白尿。

3、冷反應(yīng)性自身冷凝集素通常是IgM,當(dāng)外周循環(huán)溫度比較低時,結(jié)合到紅細胞上,并且使得補體致敏紅細胞。當(dāng)紅細胞循環(huán)回到溫暖部位時,IgM從紅細胞上放散下來,但是補體被保留著。在循環(huán)紅細胞上出現(xiàn)的補體成分是C3,有些是C4.所以在幾乎所有的病例中,補體是紅細胞上要測定的蛋白。

4、在少的病例中冷反應(yīng)性自身抗體是IgG,它可能不結(jié)合補體。如果在DAT的所有階段在冷條件下進行,使用冷鹽水和冷抗球蛋白試劑,否則IgG可能被遺漏掉。

5、自身冷抗體的特異性可能是抗-HI、抗-I、抗-i,罕見抗-Pr或其他(Gd,SdX)特異性。
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