確保培養(yǎng)基平皿的質(zhì)量需注意的事項
閱讀次數(shù):650 發(fā)布時間:2021/2/23 10:04:08
當科學(xué)技術(shù)飛速發(fā)展,有關(guān)微生物檢測的高科技方法可謂如若瀚海。雖然培養(yǎng)皿檢測微生物是個古老的、傳統(tǒng)的檢測方法,但由于它具有可以直接分離鑒別樣品、操作方便、結(jié)果可靠等優(yōu)點,所以至仍廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生,臨床檢驗、實驗動物、食品、化妝品、工農(nóng)業(yè)、環(huán)保等眾多域。在藥品質(zhì)量控制、安全評價和疾病診斷中尤其發(fā)揮著重要的作用。
培養(yǎng)基是微生物試驗的基礎(chǔ),直接影響微生物試驗結(jié)果,而成品預(yù)裝培養(yǎng)基平皿是培養(yǎng)基中的種,是由脫水培養(yǎng)基完全溶解于水中,矯正PH值,然后滅菌和分裝于平皿而成。無論是實驗室配制的培養(yǎng)基平皿或商品化的成品預(yù)裝培養(yǎng)基平皿,其質(zhì)量都依賴于其制備的整個過程。采用不適宜方法制備的培養(yǎng)基將影響微生物的生長或復(fù)蘇,從而影響試驗結(jié)果的可靠性。所以要確保培養(yǎng)基平皿的質(zhì)量,需特別注意以下事項:
1、選擇適宜的培養(yǎng)基制備方法,不得使用結(jié)塊或顏色發(fā)生改變的脫水培養(yǎng)基。
2、培養(yǎng)基滅菌應(yīng)按照生產(chǎn)商提供的或經(jīng)驗證的參數(shù)進行,避免采用不適當?shù)募訜岷蜏缇鷹l件,而引起培養(yǎng)基顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或pH值的改變。
3、應(yīng)確定每批培養(yǎng)基滅菌后的pH值(冷卻至室溫25℃測定)。若培養(yǎng)基處方中未列出pH值的范圍,除非經(jīng)驗證表明培養(yǎng)基的pH值允許的變化范圍很寬,否則,pH值的范圍不能超過規(guī)定值±0.2。
4、成品預(yù)裝培養(yǎng)基平皿應(yīng)確保無菌,并且平皿不得破裂,盡量避免形成氣泡,固體培養(yǎng)基表面不得產(chǎn)生裂縫或漣漪,在冷藏溫度下不得形成結(jié)晶,不得污染微生物等。
5、培養(yǎng)基升溫滅菌過程中溫度上升緩慢或滅菌后降溫過慢,可能導(dǎo)致培養(yǎng)基的過熱或過度滅菌,定程度上會降低微生物培養(yǎng)基促生長的質(zhì)量,所以成品預(yù)裝培養(yǎng)基平皿應(yīng)通過微生物促生長試驗進行驗證。
6、用于環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基平皿必須特別防護,好采用三層包裝和終端滅菌。不建議采用實驗室自制的培養(yǎng)皿通過100%預(yù)培養(yǎng)后用于潔凈區(qū)環(huán)境采樣,因為預(yù)培養(yǎng)過程中失水會影響微生物生長,且還存在培養(yǎng)皿被污染的可能。
7、貯藏和運輸條件應(yīng)使成品培養(yǎng)基低限度的失去水分并提供機械保護、避光保存。含瓊脂培養(yǎng)基平皿不得在0℃或0℃以下存放,冷凍可能破壞凝膠特性。
培養(yǎng)基平皿制備過程質(zhì)量控制和貯藏條件是提供優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基的保證。潔凈區(qū)環(huán)境浮游菌、沉降菌及表面微生物監(jiān)測用培養(yǎng)基般采用胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA),必要時可加入適宜的中和劑;當監(jiān)測結(jié)果有疑似真菌或考慮季節(jié)因素影響時,可增加沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA)。