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遠(yuǎn)慕生物:合成培養(yǎng)基配制實(shí)驗(yàn)
閱讀次數(shù):543 發(fā)布時(shí)間:2020/12/7 9:55:39
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實(shí)驗(yàn)方法原理:

干粉型培養(yǎng)基是用球磨機(jī)或噴霧法將各種培養(yǎng)液成分混合后制成,具有性質(zhì)穩(wěn)定、便于貯存和運(yùn)輸、使用方法簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。具有維持細(xì)胞生存和代謝需要的效果,與傳統(tǒng)方式制備的合成培養(yǎng)基一樣好。

干粉培養(yǎng)基因顆粒極細(xì),很容易完全溶解于水,配制培養(yǎng)液方法極易掌握,只要按照說(shuō)明書(shū)將規(guī)定重量的干粉溶解在一定量的水中即可;或按比例配制,經(jīng)過(guò)消毒滅菌后即使用。


實(shí)驗(yàn)材料: 干粉

試劑、試劑盒:蒸餾水 NaHCO3 HCl NaOH

儀器、耗材:濾膜

實(shí)驗(yàn)步驟:

 用干粉制備培養(yǎng)液的過(guò)程如下

1.  制備出去離子水(玻璃三蒸餾水);

2.  加溫水至15—30 ℃;

3.  把干粉加入水中,攪拌令之溶解;

4.  加NaHCO3;

5.  加水至*終量;

6.  必要時(shí)用1N HCl 或1N NaOH 調(diào)節(jié)pH;因?yàn)V過(guò)的pH 可能受影響;

7.  用0.22 μm 或小于此微孔濾膜濾過(guò)消毒。

注意事項(xiàng):

1.  不同廠家生產(chǎn)的同種產(chǎn)品其成分比例可能不全相同,配制方法也不同。

2.  有的培養(yǎng)基需加熱或通氣來(lái)幫助溶解,此外還應(yīng)注意有的培養(yǎng)基成分不完全,要求另外加入補(bǔ)充成分。

3.  如谷氨酰胺就是時(shí)常再單獨(dú)加入的成分。另外一般都不含NaHCO3 成分,也需配制時(shí)自行加入。

4.  但總的原則是配制過(guò)程中要使每一種成分都必須充分溶解和避免出現(xiàn)沉淀。

5.  所以在配制培養(yǎng)液時(shí),要按照各種成分的性質(zhì)、分成若干組分個(gè)別溶解,*后按比例和一定順序混合。

6.  掌握1—2 種粉劑的配法即可,其它大同小異。
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