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抗生素及抗生素殘留檢測方法
閱讀次數(shù):484 發(fā)布時間:2020/11/11 11:23:45
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抗生素(antibiotics)是由微生物(包括細菌、真菌、放線菌屬)或高等動植物在生活過程中所產(chǎn)生的具有抗病原體或其它活性的一類次級代謝產(chǎn)物,能干擾其他生活細胞發(fā)育功能的化學物質(zhì)。

抗生素作為一種能抑制和殺滅細菌的藥物,已被廣泛用于醫(yī)療衛(wèi)生、畜禽養(yǎng)殖、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等行業(yè),為社會的經(jīng)濟發(fā)展做出了很大的貢獻。在畜禽養(yǎng)殖業(yè)抗生素主要是作為飼料添加劑,用于預(yù)防和治療動物的疾病以及促進動物的生長。但是畜禽養(yǎng)殖業(yè)中抗生素的不合理應(yīng)用的現(xiàn)象已經(jīng)很普遍,不可避免的造成牛奶中殘留抗生素,不僅危害人類健康,同時也影響牛奶的品質(zhì),造成重大經(jīng)濟損失,所以需要抗生素檢測手段來規(guī)范這種現(xiàn)象。

檢測方法

ELISA酶聯(lián)免疫技術(shù)

Enzyme Linked Immunosorbent Assay(簡寫ELISA)

指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,進行免疫反應(yīng)的定性和定量方法。

具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。

牛奶中抗生素殘留的危害與檢測

這一方法的基本原理是:

①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。

②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。

在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質(zhì)分開,*后結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地地放大反應(yīng)效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。

免疫膠體金技術(shù)

Immune colloidal gold technique

指以膠體金作為示蹤標志物應(yīng)用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術(shù)。

具有操作便捷、安全,檢測快速、準確,成本低等優(yōu)點。

免疫層析法 (Immunochromatography)是一種基于免疫膠體金技術(shù)的快速診斷技術(shù),實質(zhì)上是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到納米金顆粒表面的包被過程。

吸附機理可能是納米金顆粒表面負電荷,與蛋白質(zhì)的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結(jié)合,而且吸附后不會使生物分子變性,由于金顆粒具有高電子密度的特性,在金標蛋白結(jié)合處,在顯微鏡下可見黑褐色顆粒,當這些標記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時,肉眼可見紅色或粉紅色斑點,因而用于定性或半定量的快速免疫檢測方法中。

由于球形的納米金粒子對蛋白質(zhì)有很強的吸附功能,可以與葡萄球菌A 蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白等非共價結(jié)合,因而在基礎(chǔ)研究和實驗中成為非常有用的工具。

免疫層析是以NC膜為載體,利用微孔膜的毛細管作用,使滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移,如同層析一般。金磁微粒復合物干片粘連在近NC膜條下端(C),膜條測試區(qū)(T)包有特異抗體,當試紙條下端進入液體標本樣中,下端吸水材料吸取液體向上端移動,流經(jīng)C處時,使干片上的金磁微粒復合物復溶,并帶動其向膜條滲移,若標本有特異性抗原時,可與金磁微粒復合物的抗體結(jié)合,形成的金標抗原—抗體復合物流至測試區(qū),被固相抗體所捕獲,形成抗體—抗原—金標抗體復合物,在膜上T處出現(xiàn)紅色控制線。
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