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彎曲菌的分離,可使用顯色培養(yǎng)基
閱讀次數(shù):600 發(fā)布時間:2020/11/4 9:59:16
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彎曲菌是一種常見的導致人類腸炎的致病菌,以腹瀉為主要特征,并可從糞便中分離出來。
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ISO于2017年發(fā)布了新版的ISO10272-1:2017標準,即《食品鏈的微生物學,彎曲菌屬檢測和計數(shù)的水平方法》。其中建議的彎曲菌檢測方案,依據(jù)樣本類型和檢測目的,分為三種:1)在彎曲菌多的時候,不需要增菌,用方案C;2)對于彎曲菌和背景菌都較少的情況,用方案A,例如烹制過的或低溫食品。取樣后再Bolton肉湯微需氧37℃先培養(yǎng)4-6h,再41.5℃培養(yǎng)44h±4h;3)對于彎曲菌少,背景菌多的情況,例如生肉、生乳,采用方案B,在Preston肉湯中微需氧41.5℃培養(yǎng)24h±2h。

增菌后,方案A是采用mCCD瓊脂和另一款其選擇劑不同于mCCD的彎曲菌選擇分離培養(yǎng)基來分離,方案B是采用mCCD瓊脂來分離。均為微需氧41.5℃培養(yǎng)44h±4h。在mCCD瓊脂上彎曲菌典型菌落為灰色。對于ISO10272-1:2017中方案A所提到的另一款其選擇劑不同于mCCD的彎曲菌選擇分離培養(yǎng)基,可選擇HiCrome彎曲菌顯色培養(yǎng)基(廠家:HiMedia,貨號M2020,配合彎曲菌選擇性添加劑(貨號FD178)一起使用)。該顯色培養(yǎng)基含有復合蛋白胨、氯化鈉、多種顯色劑、生長因子和瓊脂。適用于食品樣本和臨床樣本。培養(yǎng)基配好為在平皿中為黃色透明至輕微不透明凝膠。35-37℃孵育24-48小時后,彎曲菌菌落為淡紫色(下圖),回收率≥50%。而金葡菌和大腸埃希菌均被抑制。

傳統(tǒng)的彎曲菌培養(yǎng)基,是使用改良的黑色活性炭頭孢哌酮脫氧膽酸瓊脂(mCCDA)。但彎曲菌菌落在黑色的培養(yǎng)基上為無色,通常很難檢測到。而HiCrome彎曲菌顯色培養(yǎng)基在mCCDA培養(yǎng)基基礎(chǔ)上研發(fā)出來,其鑒別能力顯著優(yōu)于mCCDA培養(yǎng)基。
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