胎
牛血清是
細(xì)胞培養(yǎng)中常用必備的添加
培養(yǎng)基。它營養(yǎng)豐富，大約含有三四百種不同成分，具有基礎(chǔ)培養(yǎng)基所不具備的營養(yǎng)因子。
它給細(xì)胞提供的益處主要有六個方面
1>提供細(xì)胞生長所需的天然激素或天然的生長因子。
2>提供天然的結(jié)合
蛋白，能識別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和激素等，能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。已知清蛋白(albumin）即具有上述功能，并對細(xì)胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。
又如胎牛血清中富含胎球蛋白（Fetuin），具有多個鈣離子結(jié)合位點(diǎn)，因而能調(diào)節(jié)和維持血清中的鈣離子濃度。
3>天然含有粘附蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分，促進(jìn)細(xì)胞的附著、鋪展。
4>提供解毒功能。這主要通過血清中的某些蛋白與有毒的金屬離子結(jié)合來完成的。如金屬硫蛋白，對多種重金屬有高度親和性，并可清除細(xì)胞生長環(huán)境中的氧自由基（·O），具有很強(qiáng)的抗氧化活性，可防止細(xì)胞衰老。
5>提供酸堿度緩沖的作用，以及維持滲透壓。
6>提供蛋白酶抑制劑，使細(xì)胞免受蛋白酶的損傷。因此在細(xì)胞消化時，常用含血清的培養(yǎng)液終止胰酶對細(xì)胞的作用。
由于胎牛血清幾乎是通用的生長添加物，適合動物、人和
昆蟲細(xì)胞等許多類型細(xì)胞的培養(yǎng)，因此使用血清不需要為每一類細(xì)胞優(yōu)化培養(yǎng)基，節(jié)省了大量時間和精力。
血清保存注意事項(xiàng)：
（1）需要長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此，血清在凍入低溫冰箱前，必須預(yù)留一定體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
（2）熱滅活是指56℃， 30分鐘加熱已完全解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分（complement）滅活。除非必須，一般不建議作此熱處理，因?yàn)闊崽幚頃斐裳宄恋砦镲@著增多，而且還會影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體參與反應(yīng)有：細(xì)胞毒作用， 平滑肌細(xì)胞收縮， 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺， 增強(qiáng)吞噬作用， 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化。
（3）瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法：-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
（4）一般廠商提供的血清為無菌，無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾，切勿直接過濾血清。
（5）血清中的沉淀物 絮狀物：主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成，這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量�？捎秒x心3000rpm, 5分鐘去除，也可不用處理。 顯微鏡下"小黑點(diǎn)":經(jīng)過熱處理過的血清，沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染。一般情況下，此小黑點(diǎn)不會影響細(xì)胞生長，但如果懷疑血清質(zhì)量，則應(yīng)立即停止使用，更換另一批號的血清。
（6）切勿將血清在37℃放置太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中的有效成分會破會而影響血清質(zhì)量。
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