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識(shí)別:細(xì)菌在顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,有球形,鏈形,桿形等。大家不必深究。只要發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液渾濁變黃,培養(yǎng)瓶頂部有一層細(xì)沙一樣的東西。就知道大事不好啦。見(jiàn)下圖。
處理:可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理�?梢杂盟沫h(huán)素,慶大霉素,或者鏈霉素,前兩者的工作濃度是50 μg/mL;鏈霉素的工作濃度是100 μg/mL。其實(shí),毛毛蟲(chóng)說(shuō)句實(shí)話,一旦發(fā)生污染,就已經(jīng)大勢(shì)已去了。如果細(xì)胞不是特別特別珍貴的話,還是趁早扔了,重起爐灶吧。
所以,*重要的還是防范于未然。做好培養(yǎng)間,CO2孵箱,器皿和培養(yǎng)液的消毒滅菌工作。在操作的時(shí)候,嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作規(guī)范。
2、霉菌
識(shí)別:因?yàn)榕囵B(yǎng)液是清亮的,所以霉菌污染非常難以早期發(fā)現(xiàn),等發(fā)現(xiàn)時(shí)往往已經(jīng)為時(shí)過(guò)晚了。培養(yǎng)液中慢慢地出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見(jiàn)呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,如同風(fēng)中柳絮。細(xì)胞仍可生長(zhǎng),但時(shí)間一長(zhǎng),細(xì)胞的狀態(tài)就變差。見(jiàn)下圖。
處理:細(xì)胞一旦被霉菌污染,很難挽救,兩性霉素B或制霉菌素都于事無(wú)補(bǔ),建議果斷舍棄該污染細(xì)胞,將環(huán)境徹底消毒。
采用酒精徹底底地擦洗一遍CO2孵箱。然后再用新潔爾滅擦洗一遍。把水盤(pán)里加上飽和量的硫酸銅。
3、支原體:
識(shí)別:多為多邊形,培養(yǎng)液一般會(huì)變渾濁。支原體感染細(xì)胞以后,細(xì)胞病變不很明顯,只是和你一起慢慢變老。支原體污染后,可影響所有的細(xì)胞生長(zhǎng)參數(shù)。故進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,必須確認(rèn)細(xì)胞為mycoplasma-free,實(shí)驗(yàn)結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義。
處理:沒(méi)有什么好處理的。直接扔了吧。
4、黑蛟蟲(chóng):
識(shí)別:誰(shuí)都不知道所謂的“黑膠蟲(chóng)”是什么東西。據(jù)說(shuō)是納米級(jí)的細(xì)菌。低倍下為黑色點(diǎn)狀,高倍下可看見(jiàn)黑色的小蟲(chóng)游來(lái)游去。培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會(huì)太影響。但是如果太多了,也會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
處理:因?yàn)楦静恢肋@是什么物種,所以也談不上什么處理方式。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話,可以增加細(xì)胞的種板密度,以提高細(xì)胞的生存率。
5、真菌:
識(shí)別:真菌污染和霉菌污染差不多。一般培養(yǎng)液清亮,所以很難早期發(fā)現(xiàn)。鏡下有時(shí)候象絲狀,有時(shí)候象珊瑚狀。慢慢地會(huì)長(zhǎng)出很細(xì)的黑色絲狀物。這個(gè)時(shí)候,已經(jīng)晚了,細(xì)胞很難救活了。
處理:同霉菌污染一樣,沒(méi)有什么好處理的,直接扔了吧。然后徹底消毒滅菌培養(yǎng)間,CO2孵箱,器皿和培養(yǎng)液。
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