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阿儀網(wǎng)咨詢P0431/pDS132大腸自殺
質(zhì)粒產(chǎn)品名稱:P0431/pDS132大腸自殺質(zhì)粒
啟動子: T7/lac
復(fù)制子: ColE1 ori,F(xiàn)1 ori
終止子: T7 terminator
質(zhì)粒分類: 大腸桿菌載體;PET系列表達(dá)質(zhì)粒
質(zhì)粒大小: 6733bp
質(zhì)粒標(biāo)簽: N-Nus, N-6×His, N-HRV 3C, C-S, C-Thrombin
原核抗性: 卡那霉素Kan
克隆菌株: DH5α
培養(yǎng)條件: 37℃,有氧,LB
表達(dá)宿主: BL21(DE3)
培養(yǎng)條件: 37℃,有氧,LB
誘導(dǎo)方式: IPTG或乳糖及其類似物
5'測序引物: T7:TAATACGACTCACTATAGGG
3'測序引物: T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
質(zhì)粒(plasmid)是細(xì)菌或
細(xì)胞染色質(zhì)以外的,能自主復(fù)制的,與細(xì)菌或細(xì)胞共生的遺傳成,質(zhì)粒載體是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上為適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室操作而進(jìn)行人工構(gòu)建的質(zhì)粒。與天然質(zhì)粒相比,質(zhì)粒載體通常帶有一個(gè)或一個(gè)以上的選擇性標(biāo)記基因(如抗生素抗性基因)和一個(gè)人工合成的含有多個(gè)限制性內(nèi)切酶識別位點(diǎn)的多克隆位點(diǎn)序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量盡可能減少,以便于基因工程操作。
質(zhì)粒分類:
1.根據(jù)質(zhì)粒能否通過細(xì)菌的接合作用,可分為接合性質(zhì)粒和非接合性質(zhì)粒。接合性質(zhì)粒帶有與接合傳遞有關(guān)的基因。非接合質(zhì)粒在一定條件下通過與其共存的接合質(zhì)粒的誘動或轉(zhuǎn)導(dǎo)而傳遞。
2.根據(jù)質(zhì)粒的不相容性,可分為不相容性和相容性。不相容性指結(jié)構(gòu)相似、密切相關(guān)的質(zhì)粒不能穩(wěn)定地共存于同一宿主細(xì)菌內(nèi)的現(xiàn)象,反之為相容性。常用于流行病學(xué)的調(diào)查。
3.根據(jù)質(zhì)粒在細(xì)菌內(nèi)的復(fù)制類型可分為兩類:嚴(yán)緊控制型和松弛控制型。嚴(yán)緊控制復(fù)制型質(zhì)粒的復(fù)制酶系與染色體DNA復(fù)制共用,只能在細(xì)胞周期的一定階段進(jìn)行復(fù)制,當(dāng)細(xì)胞染色體停止復(fù)制時(shí),質(zhì)粒也就不再復(fù)制。松弛控制復(fù)制型的質(zhì)粒的復(fù)制酶系不受染色體DNA復(fù)制酶系的影響,在整個(gè)細(xì)胞生長周期中隨時(shí)都可以復(fù)制,在染色體復(fù)制已經(jīng)停止時(shí)質(zhì)粒仍能繼續(xù)復(fù)制。