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葡聚糖凝膠是通過表氯醇交聯(lián)多個葡聚糖得到的。葡聚糖凝膠 G-10、G-25這些葡聚糖凝膠是在水溶液中使用,若要用有機溶劑做為流動相。只有通過羥丙基化將葡聚糖凝膠 G轉(zhuǎn)化為可在有機溶劑中溶脹的葡聚糖凝膠。這時的產(chǎn)品為葡聚糖凝膠 LH-20或LH-60。
層析原理:
凝膠過濾:依賴于分子的大小和形狀
吸附層析:依賴于被分離化合物與凝膠之間的氫鍵數(shù)量和質(zhì)量
分配層析:依賴于分離化合物在流動相(溶劑)和固定相(凝膠)之間的分配,這主要由樣品的極性和溶劑的極性決定的。
葡聚糖凝膠 LH-20層析:
葡聚糖凝膠 LH-20的分離原理主要有兩方面:以凝膠過濾作用為主,兼具反相分配的作用(在反相溶劑中)。因為凝膠過濾作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脫下來,小分子的化合物保留強,zui后出柱。如果使用反相溶劑洗脫,葡聚糖凝膠 LH-20對化合物還起反相分配的作用,所以極性大的化合物保留弱,先被洗脫下來,極性小的化合物保留強,后出柱。如果使用正相溶劑洗脫,這主要靠凝膠過濾作用來分離。
葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠,含有大量的羥基,很容易在水中和電解質(zhì)溶液中溶脹。G型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯(lián)度,因此它們的溶脹度和分級分離范圍也有所不同。葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影響。
葡聚糖凝膠有不同的粒度。超細級的葡聚糖凝膠是用于需要極高分辨率的柱色譜和薄層色譜。粗級和中級的凝膠用于制備性色譜過程,可在較低的壓力下獲得較高的流速。另外,粗級也可用于批量工藝。
葡聚糖凝膠不溶于一切溶劑(除非它被化學(xué)降解)。它在水、鹽溶液、有機溶劑、堿和弱酸性溶液中都是穩(wěn)定的,在強酸中凝膠骨架的糖苷鍵被水解。長期接觸氧化劑將破壞凝膠,因而應(yīng)避免使用。
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