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掌握這些過濾技巧,至少能讓實驗效率提高一倍
閱讀次數(shù):2417 發(fā)布時間:2018/8/24 11:12:33
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過濾應該是實驗室中非常常見的實驗,進入實驗室后必須掌握的基礎技能。特別是做一些分析型的檢測實驗,一般都會進行稀釋和過濾。然而根據(jù)樣品量多量少的不同,需要選擇不同的過濾裝置。
 

可能很多小伙伴在做實驗時,只是按部就班,師兄師姐讓怎么做就怎么做,也沒有思考太多原因為什么要那樣做。那么,今天我們就來系統(tǒng)地說說過濾的一些小妙招,知道這些,興許還會顛覆你之前的實驗,至少還能讓實驗效率提高一倍呢。那么,先來說說針對小量樣品的過濾。


 

 


01、一次性針頭式過濾器
一次性針頭式過濾器與一次性注射器配套使用,可組裝成一個簡易的過濾裝置,適用于液體量小的過濾,量大或者不溶物過多會導致堵塞,主要應用于樣品的預濾,實驗室生物流體、培養(yǎng)基和媒介添加劑的除菌過濾。
 


 


02、millipore 超濾離心管
蛋白濃縮和換 Buffer 通常使用超濾離心管,有多種品牌,但是*常用的要屬 Millipore 品牌。Millipore 有多種型號的供選擇,選擇合適的超濾管,主要視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。


 


剛做實驗的人員肯定會好奇到底選擇多大截留分子量比較合適呢?10kDa、5kDa、還是 30kDa?通常應截留分子量不應大于目的蛋白分子量的 1/3,比如目的蛋白分子量為 35kDa,就可以選擇 10kDa 截留分子量的超濾 管。若目的蛋白分子量為 10kD 左右,則可以用截留分子量 3kD 的超濾管。使用時,需要將超濾離心管放在離心機中,一定要注意質量和重心二者都要達到平衡,且轉速不可太快,否則直接損壞超濾膜。超濾管是可重復使用的,使用一次就扔掉確實太浪費;但也不會使用太多次,一般也就用一兩次就換新的。
 


 


保存時要特別注意,將超濾離心管的超濾膜泡在疊氮鈉溶液或 20% 的乙醇溶液中,防止長菌,而且防干,只要超濾膜浸了水,就不可以再讓它干,否則超濾膜的分子結構就變了。切記不可以用超聲洗滌。
接下來,要講的是針對大量樣品的過濾:一般是濾膜與濾杯配套使用。
 


 


03、微孔濾膜
一次性針頭式過濾器雖然方便,但是只能過濾少量樣品。當需要大量過濾時,可以選擇微孔濾膜結合進行濾杯過濾。微孔濾膜主要用于樣品分析特別是色譜分析中流動相及樣品的過濾,對保護色譜柱及輸液泵管路系統(tǒng)和進樣閥等不被污染具有良好的作用。
目前已廣泛應用在重量分析、微量分析、膠體分離及無菌實驗中。與一次性針頭式過濾器一樣,膜的直徑分別有 47、50 mm,其孔徑分為 0.22、0.45 μm,同樣分為有機系和水系,過濾樣品時根據(jù)液體的性質對應選擇。
 


 


04、攪拌式超濾杯
在操作大體積樣本時,Millipore 標準的 Amicon Ultra 超濾管(0.5/2/4/15mL)已經明顯不能滿足需求,這時超濾杯就非常必要了。Amicon 攪拌式超濾杯方便好用,功能非常強大。比代超濾杯設計更加符合人體工程學,組裝、拆卸以及開關都極為方便。
配套膜片選擇更廣,包括超濾膜和微濾膜以及您自選的膜片。可進行溫和濃縮、脫鹽、換液,更適合大體積病毒、外泌體/囊泡、蛋白溶液等樣品,同時,提供操作視頻和中文指南,技術支持完備。另外,多種容量可選:50mL,200mL 和 400mL,根據(jù)實驗需要選擇。
 


 


05、真空過濾器
一次性真空式過濾器由透明高分子材料聚苯乙烯(GPPS)制成,利用真空泵提供壓力差,用于組織培養(yǎng)液和其他實驗室流體溶液的大量過濾,樣品處理量可達數(shù)升,過濾后的樣品可直接以無菌的收集瓶保存。4 種上杯的過濾膜類型可選:MCE、尼龍、PVDF 和 PES。膜孔徑范圍:0.10μm,0.22μm,0.45μm;外置有一個抽真空小孔,可一次性快速過濾大量實驗流體。
過濾裝置穩(wěn)定,重心低,可防止樣品濺出。易讀取標志顯示濾過容量。運輸過程中,優(yōu)質防塵塑料密封式袋子單個獨立內包裝,不易污染。另外,可配有單獨的過濾器上杯和收集瓶,以供不同實驗要求選用。
 


 


06、濾杯
這款濾杯可直接接藍蓋瓶,可反復使用。不需用抽濾瓶,接上真空泵可直接使用。收集瓶帶有刻度,濾過液可直接保存于收集瓶。可高壓滅菌,重復使用,更經濟劃算。適用濾膜直徑為 47 毫米。使用時,過濾樣品無需單獨清洗,有機溶液殘留會揮發(fā)掉,水溶液也會自行蒸發(fā)干。
 


 


07、多聯(lián)過濾器
多聯(lián)過濾器專為多個樣品同時過濾而設計制造。目前,國內實驗室在對溶液進行過濾時,一般采用玻璃材質砂芯過濾裝置,這種方法每次只能過濾一個樣品,過濾速度慢,效率低,人工勞動強度大。對于需要同時過濾多個樣品的操作者,選擇使用多聯(lián)過濾器更為方便。由于它的每一個過濾架均有獨立的控制閥門,因此僅需用一個真空泵便可支持單聯(lián)或多聯(lián)同時操作。全不銹鋼材質的多聯(lián)過濾器支架可在 180℃ 的高溫下進行過濾操作;鋁合金夾子設計合理緊密,可以方便地將濾杯與中間過濾頭合在一起并保證嚴格密封而不會漏液。同時,316L 衛(wèi)生級不銹鋼材質耐酸堿,耐腐蝕,易于高溫消毒,使分析結果更加穩(wěn)定可靠。
 

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