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上海遠(yuǎn)慕教您如何選擇ELISA試劑盒的OD值
閱讀次數(shù)：637 發(fā)布時(shí)間：2016/11/11 16:36:03

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elisa試劑盒一般底物效果時(shí)刻，以10-30分鐘為宜。底物運(yùn)用液有必要新鮮制造，尤其是H2O2在臨用前參加。

ELISA試劑盒進(jìn)行各項(xiàng)試驗(yàn)條件的挑選是很首要的，其間包含:

固相載體的挑選：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。

其方法可所以凹孔平板、試管、珠粒等。現(xiàn)在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。

不管何種載體，在運(yùn)用前均可進(jìn)行挑選：用等量抗原包被，在同一試驗(yàn)條件下進(jìn)行反響，查詢其顯色反響是不是均一性，據(jù)此判明其吸附功用是不是超卓。

包被抗體（或抗原）的挑選：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，央求純度要好,吸附時(shí)一般央求PH在9.0～9.6之間。

吸附溫度，時(shí)刻及其蛋白量也有必定影響,一般多選用4℃ 18～24小時(shí)。

蛋白質(zhì)包被的*適濃度需進(jìn)行滴定：即用不一樣的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相一同，查詢陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。

ELISA試劑盒挑選OD值而蛋白量起碼的濃度。

對(duì)于大都蛋白質(zhì)來說一般為1～10μg/ml。

酶符號(hào)抗體作業(yè)濃度的挑選：首先用直接ELISA法進(jìn)行開端效價(jià)的滴定（見酶符號(hào)抗體部份）。

然后再固定其它條件或選用“方陣法”（包被物、待檢樣品的參看品及酶符號(hào)抗體分別為不一樣的稀釋度）在正式試驗(yàn)體系里精確地滴定其作業(yè)濃度。

酶的底物及供氫體的挑選：對(duì)供氫體的挑選央求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反響，而自身無色。

有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌效果，應(yīng)留心防護(hù)。

ELISA試劑盒有條件者應(yīng)運(yùn)用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是現(xiàn)在較為滿意的供氫體。

底物效果一段時(shí)刻后，應(yīng)參加強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以連續(xù)反響。