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EDTA抗原修復(fù)液(50×)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
組織在制作過(guò)程中,由于化學(xué)試劑的作用封閉了抗原,又由于熱的作用致使部分抗原的肽鏈發(fā)生扭曲,致使在免疫組化的染色過(guò)程中丌能將其顯示出來(lái),為了解決上述的問(wèn)題,利用化學(xué)試劑和熱的作用將這些抗原重新暴露出來(lái)或修正過(guò)來(lái)的過(guò)程稱(chēng)為抗原修復(fù)。檸檬酸鹽、EDTA或 Tris等緩沖液在熱的條件下可以使被福爾馬林屏蔽的抗原重新暴露出來(lái),同時(shí)又丌會(huì)對(duì)抗原表位造成破壞,從而提高抗原的檢出率,降低背景染色,提高診斷的準(zhǔn)確率。 EDTA抗原修復(fù)液(EDTA Antigen Retrieval solution, 50×)是一種常用的抗原修復(fù)液,可以有效去除醛類(lèi)固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián),充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類(lèi)試劑固定后的抗原修復(fù)。 細(xì)胞或組織用多聚甲醛、福爾馬林或其它醛類(lèi)試劑固定后,會(huì)導(dǎo)致蛋白之間的交聯(lián),遮蔽樣品抗原位點(diǎn),導(dǎo)致免疫染色信號(hào)減弱,甚至出現(xiàn)一些假陽(yáng)性染色結(jié)果。抗原修復(fù)可以提高石蠟切片的免疫染色效果,亦可以丌同程度的提高冰凍切片的染色效果。當(dāng)冰凍切片免疫染色效果丌理想時(shí),考慮進(jìn)行抗原修復(fù)。按照每個(gè)片子需要 10ml抗原修復(fù)液(1×)計(jì)算,100ml抗原修復(fù)液(50×)可以用于 500個(gè)樣本的抗原修復(fù)。
Ø
產(chǎn)品組成:
名稱(chēng)
規(guī)格 |
500ml |
Storage |
EDTA Antigen Retrieval solution(50×) | 500ml | 4℃ |
使用說(shuō)明書(shū) | 1 份 |
自備材料:
1、 系列乙醇
2、 雙蒸水或去離子水
3、 加熱設(shè)備
4、 免疫染色洗滌液
操作步驟(僅供參考):
(一)石蠟切片
1、脫蠟至水
①二甲苯 3次,每次 3~5min。
②無(wú)水乙醇脫水 2次,每次 3~5min。
③95%的乙醇,3~5min。
④90%的乙醇,3~5min。
⑤80%的乙醇,3~5min。
⑥70%的乙醇,3~5min。
⑦蒸餾水沖洗 2次,每次 3~5min。
2、抗原修復(fù)
①用去離子水或雙蒸水稀釋 EDTA Antigen Retrieval solution(50×)至 1×。
②將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中,95℃或沸水加熱約 10~30min。
③ 抗原修復(fù)液(1×)使用前需預(yù)熱到 95~100℃。如果使用微波爐加熱,避免暴沸和過(guò)多的
水分蒸發(fā)。隨后大約在 20~30min內(nèi)冷卻至室溫。
3、免疫染色洗滌液洗滌 1~2次,每次 3~5min。
4、封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
(二)冰凍切片:
1、用去離子水或雙蒸水稀釋 EDTA Antigen Retrieval solution(50×)至 1×。
2、免疫染色洗滌液洗滌切片 5min。
3、將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中,95℃或沸水加熱約 10~30min
4、抗原修復(fù)液(1×)使用前預(yù)熱至 95~100℃。如果使用微波爐加熱,避免暴沸和過(guò)多的水
分蒸發(fā)。隨后大約在 20~30min內(nèi)冷卻至室溫。
5、免疫染色洗滌液洗滌 1~2次,每次 3~5min。
6、進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
(三)其它樣品:
其它樣品參考石蠟切片或冰凍切片進(jìn)行操作。
注意事項(xiàng):
1、 浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中,*佳的加熱時(shí)間需根據(jù)丌同的樣品和目的蛋白自行摸索。
2、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期: 12個(gè)月有效。
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