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技術(shù)文獻(xiàn)

流式細(xì)胞術(shù)工作原理與實(shí)驗(yàn)步驟
閱讀次數(shù):89 發(fā)布時(shí)間:2024/10/29 9:41:29
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 流式細(xì)胞術(shù)原理

流式細(xì)胞術(shù)是一種細(xì)胞分析技術(shù)。

流式細(xì)胞術(shù)工作原理是在細(xì)胞分子水平上通過單克隆抗體對(duì)單個(gè)細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行多參數(shù)、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個(gè)細(xì)胞,并能同時(shí)從一個(gè)細(xì)胞中測(cè)得多個(gè)參數(shù),具有速度快、精度高、準(zhǔn)確性好的優(yōu)點(diǎn),是當(dāng)代xian進(jìn)的細(xì)胞定量分析技術(shù)。

流式細(xì)胞術(shù)是一種用于細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞分類、生物標(biāo)志物檢測(cè)和蛋白質(zhì)工程的技術(shù)。將熒光標(biāo)記或有自身固有熒光細(xì)胞懸液,通過噴嘴噴射出,以單細(xì)胞流動(dòng)的液流,用波長可調(diào)的激光照射并逐一探測(cè)、記錄和分析每一個(gè)細(xì)胞的熒光,能以每幾千個(gè)細(xì)胞的速率,實(shí)時(shí)對(duì)這些細(xì)胞的物理或化學(xué)特征,進(jìn)行多參數(shù)分析。

流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)步驟:

1、制備細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)

2、分裝,按照每個(gè)EP(1.5ml)管1-2*10 6個(gè)細(xì)胞分裝,3500rpm,4度離心。

3、用100ulPBS重懸,加入10ul大鼠血清封閉,4度避光30min。

4、加入相應(yīng)的熒光標(biāo)記的抗體,混勻,避光,4度孵育30min。

5、加入1mlPBS洗兩遍。

6、用200ul PBS重懸,經(jīng)紗布過濾轉(zhuǎn)至流式管,上檢測(cè)。

細(xì)胞或者大小接近的顆粒物質(zhì)都可以檢測(cè)。

樣本通過鞘液的輸送,成單個(gè)隊(duì)列依次通過激光束。樣本事先可以根據(jù)檢測(cè)需要被熒光標(biāo)記,通過激光束的時(shí)候就會(huì)得到熒光信號(hào),被記錄下來?梢酝瑫r(shí)標(biāo)記不同的熒光標(biāo)記做不同的檢查。優(yōu)點(diǎn)就是可以在短時(shí)間內(nèi)檢測(cè)大量的樣本(每幾千個(gè)到幾萬個(gè)細(xì)胞)。

主要應(yīng)用于各種生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷。上通用的白細(xì)胞和淋巴瘤的診斷標(biāo)準(zhǔn)就是靠流式細(xì)胞儀的分型來確定的。

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