技術文獻
瓊脂糖凝膠電泳是檢測DNA質量的一種常用方法。 它利用瓊脂糖溶化再凝固后形成的固體基質,在電場作用下,帶負電的DNA分子向陽遷移,不同大小和構型的DNA分子遷移速度不同,從而分離出不同的區(qū)帶。這種方法不僅可用于分離不同分子量的DNA,還能分離相對分子質量相同但構型不同的DNA分子。
瓊脂糖凝膠電泳的原理基于DNA分子在電場中的遷移特性。DNA分子在高于等電點的溶液中帶負電荷,在電場中向正移動。遷移速度取決于DNA分子的分子量和構型,分子量越大,遷移速度越慢。瓊脂糖凝膠的濃度也會影響DNA的遷移率,不同濃度的凝膠可以分離不同大小范圍的DNA---片段。
瓊脂糖凝膠電泳鑒定質粒DNA
瓊脂糖凝膠電泳是分離鑒定和純化DNA---片段的常用方法。DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時有電荷效應和分子篩效應,DNA分子在高于等電點的pH溶液中帶負電荷,在電場中向正移動。
由于糖磷酸骨架在結構上的重復性質,相同數量的雙鏈DNA幾乎具有等量的凈電荷,因此它們能以同樣的速度向正方向移動。
不同濃度瓊脂糖凝膠可以分離從200bp至50kb的DNA---片段。在瓊脂糖溶液中加入低濃度的溴化乙錠(ethidum bromide ,EB),在紫外光下可以檢出 10ng的DNA條帶,在電場中,pH8.0條件下,凝膠中帶負電荷的DNA向陽遷移。
質粒DNA提取方法
1,堿裂解法
2,煮沸裂解
3,羥基磷灰石柱層析法
4,質粒DNA釋放法
5,酸酚法等。
選擇哪一種方法取決于以下幾個因素
1,質粒的大小
2,大腸桿菌菌株
3,裂解后用于純化的技術和實驗要求
原創(chuàng)作者:上海遠慕生物科技有限公司
請輸入要搜索的關鍵詞
上海遠慕生物科技有限公司:細胞凍存液,氨芐青霉素溶液,人白介素ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,顯色試劑盒,新生牛血清,標準胎牛血清,牛血清白蛋白溶液,小鼠血漿,雞紅細胞,透明質酸酶溶液,微生物培養(yǎng)基,胰蛋白酶儲存液,兩性霉素B溶液,LB冷凍緩沖液,ABTS試劑,磷酸酶抑制劑,EB緩沖液,熒光染色試劑盒,肥大細胞染色液,人源基因質粒,胡蔓藤堿乙標準品,番茄紅素標準品,Pd-C-II標準品,知母皂苷E標準品,穿刺培養(yǎng)基,puc19質粒,CPD抗凝劑,熒光抗體稀釋液
地址:上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號 電話:021-58999639 傳真:021-58999639 技術支持:阿儀網 總訪問量:7290548