技術(shù)文獻(xiàn)
【簡(jiǎn)介】
抗A,抗B血型定型試劑(單克隆抗體)用A血型單克隆抗體或B血型單克隆抗體配制而成,用于鑒定人ABO血型。單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來(lái)制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。
【用途】 本試劑盒/供鑒定人血型用,具有快速簡(jiǎn)便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。
【測(cè)定原理】 利用單克隆抗A、抗B抗體和相應(yīng)的紅細(xì)胞抗原發(fā)生特異性凝集反應(yīng)的原理。能和抗A抗體發(fā)生凝集反應(yīng),而不和抗B抗體反應(yīng)的為A型;和抗B抗體發(fā)生凝集反應(yīng)而不和抗A抗體發(fā)生反應(yīng)的為B型;同時(shí)能和抗A及抗B抗體發(fā)生凝集反應(yīng)為AB型;而不被抗A及抗B抗體凝集的則為O型。
【測(cè)定步驟】
1.被檢者的抗凝血,用生理鹽水洗滌1-2次后,取壓積紅細(xì)胞配成5%的生理鹽水懸液。
2.取小試管5支,分別標(biāo)明抗A、抗B、A細(xì)胞、B細(xì)胞、O細(xì)胞。在抗A管內(nèi)加1滴抗A試劑,抗B管內(nèi)加1滴抗B試劑,A細(xì)胞、B細(xì)胞、O細(xì)胞管內(nèi)各加被檢血清1滴,然后在抗A、抗B管內(nèi)各加被檢紅細(xì)胞1滴,A細(xì)胞管內(nèi)加1滴5% A型紅細(xì)胞懸液,B細(xì)胞管內(nèi)加1滴5% B型紅細(xì)胞懸液,O細(xì)胞管內(nèi)加1滴5% O型紅細(xì)胞懸液。
3.混勻,離心1000轉(zhuǎn)/分,1分鐘。然后判斷結(jié)果。
【結(jié)果判斷】
按下表判別被檢者血型
被檢者血型 正定型 反定型
抗A 抗B A細(xì)胞 B細(xì)胞 O細(xì)胞
A + - - + -
B - + + - -
O - - + + -
AB + + - - -
“+”表示凝集,“-”表示不凝集
【注意事項(xiàng)】
1.本試劑可用平板法(玻片法)操作,步驟如下:本試劑與受檢者全血或10%紅細(xì)胞生理鹽水懸液在玻片上按1:1比例混合,搖勻,3分鐘按照有無(wú)凝集判定結(jié)果。
2./好血型試驗(yàn)與細(xì)胞試驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行。
3.單克隆抗體試劑發(fā)生定型疑問(wèn)時(shí),用人血清型試劑來(lái)裁決。
原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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