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穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)物/標(biāo)記物分析介紹
閱讀次數(shù):432 發(fā)布時間:2021/7/1 9:33:20
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同位素標(biāo)記 (同位素內(nèi)標(biāo))較于其同種元素的未標(biāo)物具有質(zhì)子數(shù)相同中子數(shù)變化的特點,通過用同位素取代特定原子來標(biāo)記反應(yīng)物,然后使反應(yīng)物進(jìn)行反應(yīng),并檢測中子數(shù)變化的原子,可通過反應(yīng)、代謝途徑或細(xì)胞跟蹤同位素。

同位素內(nèi)標(biāo)物與對應(yīng)的未標(biāo)物理化性質(zhì)相似,通過光吸收和免疫的方法無法區(qū)分,在色譜中如果將同位素內(nèi)標(biāo)物與對應(yīng)的未標(biāo)物用同樣的檢測方法,其保留時間也幾乎一致,無法分辨。

穩(wěn)定性同位素內(nèi)標(biāo)是質(zhì)譜方法即穩(wěn)定性同位素稀釋法獨有的,在質(zhì)譜(Mass)中,如果加進(jìn)同位素內(nèi)標(biāo),那測出來的值較未標(biāo)物有很大的差值,質(zhì)譜能把同位素內(nèi)標(biāo)和要檢測的物質(zhì)區(qū)分開。

可供多種穩(wěn)定同位素標(biāo)記的內(nèi)標(biāo),包括2H (氘標(biāo) D) 、13C、15N、17O、18O、34S等,放射性的同位素內(nèi)標(biāo)具有較大的傷害性,一般穩(wěn)定性同位素可以完成的建議優(yōu)-選穩(wěn)定性同位素內(nèi)標(biāo)物,若被檢測物是穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)物對應(yīng)的未標(biāo)物,那么,較被檢測物而言,對應(yīng)的同位素標(biāo)記物只是將部分氫原子(1H)、碳原子(12C)或氮原子(14N)等被2H (氘、D)、13C、15N所取代,被檢測物與對應(yīng)的穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)物理化性質(zhì)基本一致,尤其在色譜中,幾乎無法區(qū)分。

同樣是穩(wěn)定同位素標(biāo)記,13C、15N相對來說比2H(氘標(biāo)) 更好,所以氘標(biāo)(D、2H)一般也相對而言更便宜,色譜定量中,2H、13C、15N標(biāo)記的差別不大,如果需要質(zhì)譜(MS)或者核磁(NMR)定量,一般建議優(yōu)-選13C或者15N標(biāo)記。

目同位素內(nèi)標(biāo)廣泛應(yīng)用于檢測中:包括維生素檢測、膽汁酸檢測、激素檢測、兒茶酚胺檢測等。

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