對于已耗費很多時間、大量擴增起來的細(xì)胞，或經(jīng)過基因轉(zhuǎn)染、體外刺激等大量工作處理過的細(xì)胞，如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞被支原體污染了，怎么辦？遠(yuǎn)慕生物為您分析如何有效把支原體污染趕出你的細(xì)胞！
由于期工作量巨大，我們無法丟棄已有細(xì)胞。但由于價格原因，又無法使用那些昂貴試劑殺除細(xì)胞上的支原體，同時，實驗人員還需要清除細(xì)胞上的支原體污染，讓實驗得以往下推進(jìn)，以終獲得準(zhǔn)確的實驗數(shù)據(jù)。
實驗者可選用對支原體特效的抑制劑，通過對細(xì)胞的期處理，中期加藥，逐步通過4代左右的培養(yǎng)，從而將支原體污染徹底清除，確保試驗順利推進(jìn)，結(jié)果準(zhǔn)確。
支原體污染對細(xì)胞培養(yǎng)造成多方面的不良影響，已經(jīng)成為在細(xì)胞培養(yǎng)時的個嚴(yán)重問題，保守估計常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染率為15-35%，嚴(yán)重干擾實驗結(jié)果的可信度。因此，定期進(jìn)行支原體檢測和去除，確保無支原體存在細(xì)胞培養(yǎng)體系內(nèi)才能獲得準(zhǔn)確有效的實驗數(shù)據(jù)。
什么是支原體（Mycoplasma）
支原體又稱霉形體，直徑在0.1-0.3μm，是目發(fā)現(xiàn)的小的簡單的原核生物，可以輕松地通過濾膜，混入培養(yǎng)系統(tǒng)中，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分支狀等多種形態(tài)。通常依附在細(xì)胞膜表面，支原體沒有剛性的細(xì)胞壁，因此普通的抗生素對它根本不起作用，實驗室常見的種類有：口腔支原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體、發(fā)酵支原體、人型支原體、唾液支原體、肺支原體和梨支原體等。
支原體污染的后果
細(xì)菌和真菌造成的污染相對比較容易檢測、預(yù)防和去除，然而支原體造成的污染很難察覺，即使生長密度高達(dá) 107-109CFU/ml，也很難有污染跡象（渾濁、pH 變化等）。支原體污染后導(dǎo)致細(xì)胞生長變慢，狀態(tài)變差，不會馬上使細(xì)胞致死，但會影響細(xì)胞內(nèi)的各種參數(shù)，如改變細(xì)胞膜抗原性，改變細(xì)胞新陳代謝，干擾核酸的合成，改變 DNA 轉(zhuǎn)染效率，導(dǎo)致染色體畸變等。
典型的支原體污染來源
①細(xì)胞之間交叉污染； ④培養(yǎng)基或其他試劑污染；
②工作環(huán)境或?qū)嶒炂鞑牡奈廴荆?⑤制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染；
③實驗者無菌操作不佳；
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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