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技術(shù)文獻(xiàn)

實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞系的具體要求你知道嗎
閱讀次數(shù):156 發(fā)布時(shí)間:2023/6/8 10:30:20
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實(shí)驗(yàn)中建立細(xì)胞系有以下要求:

1、組織來(lái)源:細(xì)胞供體所屬物種,來(lái)自人體或者動(dòng)物;

個(gè)體性別、年齡;取材的器官或組織。

如系腫瘤組織,應(yīng)說(shuō)明臨床和病理診斷,以及病/歷號(hào)等。

2、細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè):

了解細(xì)胞一般和特殊的生物學(xué)性狀,如細(xì)胞一般形態(tài),特異結(jié)構(gòu),細(xì)胞生長(zhǎng)曲線和分裂指數(shù),倍增時(shí)間,接種率等。

如為腫瘤細(xì)胞,為說(shuō)明來(lái)源于原腫瘤組織并保持惡性,須做軟瓊脂培養(yǎng),異體接種致瘤和對(duì)正常組織侵潤(rùn)力等實(shí)驗(yàn)。

3、培養(yǎng)條件和方法;應(yīng)說(shuō)明細(xì)胞系(或株)適應(yīng)的生存環(huán)境,即指明使用的培養(yǎng)基、血清種類、用量以及適宜PH值。

細(xì)胞株、細(xì)胞系、原代細(xì)胞的概念

細(xì)胞株(cell strain)是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)細(xì)胞中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的細(xì)胞稱為細(xì)胞株。一般認(rèn)為,細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。

細(xì)胞系(cell line)是原代細(xì)胞經(jīng)/次傳代成功后即為細(xì)胞系。泛指一般可能傳代的細(xì)胞。其中能夠連續(xù)傳代的細(xì)胞叫做連續(xù)細(xì)胞系或無(wú)限細(xì)胞系,不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細(xì)胞系。大多數(shù)二倍體細(xì)胞為有限細(xì)胞系。由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限, 可稱為有限細(xì)胞系(finite cell line), 如可以連續(xù)培養(yǎng), 則稱為連續(xù)細(xì)胞系(continuous cell line), 培養(yǎng)50代以上并無(wú)限培養(yǎng)下去。人類腫瘤細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長(zhǎng)穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。

原代細(xì)胞(primary cell)是指從機(jī)體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞,稱為原代細(xì)胞。一般認(rèn)為,培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。在人工條件下使其原代細(xì)胞生存、生長(zhǎng)、繁殖和傳代,進(jìn)行細(xì)胞生命過(guò)程、細(xì)胞癌變、細(xì)胞工程等問(wèn)題的研究。

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