實(shí)驗(yàn)方法原理：皂苷別稱(chēng)堿皂體;皂素；皂甙；皂角苷；或皂草苷。皂苷是苷元為三萜或螺旋甾烷類(lèi)化合物的一類(lèi)糖苷，主要分布于陸地高等植物中，也少量存在于海星和海參等海洋生物中。 許多中草藥如人參、遠(yuǎn)志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷還具有抗菌的活性或解熱、鎮(zhèn)靜、抗癌等有價(jià)值的生物活性。
1．檢品
溶液的制備：
1）取皂角碎塊1g于大試管（或小燒杯）中，加蒸餾水15ml，于30~90°水浴上浸漬15分鐘后過(guò)濾，濾液供鑒別用。
2）取薯蕷碎塊0.5g加上法同樣制備得薯蕷水浸液。
3）取薯蕷碎塊0.5g于大試管或小錐形瓶中加95%乙醇10ml于水浴上溫浸15分鐘，濾液供鑒別。
2．鑒別試驗(yàn)：
（1）溶血試驗(yàn)：取濾紙片一小塊，于小心處滴加皂角浸液一滴，待干后于同處再滴加一滴，如是反復(fù)操作至滴加數(shù)滴，干燥后無(wú)噴霧血球試液（取牛血、羊血或兔血一份，用玻棒或棉簽攪和，除去凝集的血
蛋白，加pH7.4磷酸鹽緩沖液一份稀釋即得），數(shù)分鐘后觀察在紅色的背底中是否出現(xiàn)無(wú)紅色的黃色（或透明）斑點(diǎn)（中心處皂解浸液原點(diǎn)）。（本反應(yīng)亦可在試管中進(jìn)行，血球試液中草藥浸液中的皂苷溶解后，血球液由渾濁變?yōu)槌蚊�。此外還可在載玻片上進(jìn)行，并在顯微鏡下觀察血球破裂溶解前后的狀況）。
（2）泡沫試驗(yàn)：薯蕷浸液，皂角浸液各2ml，分別置于試管中。用力振搖一分鐘后放置，在10分鐘內(nèi)觀察二管是否都有持久性泡沫產(chǎn)生？
（3）醋酐濃硫酸試驗(yàn)（Liebermann-Burchard反應(yīng)），皂角浸液5ml，于蒸發(fā)皿中在水浴上蒸干，加入1ml醋酐使其溶解，滴于干燥比色盤(pán)中，從邊沿緩緩滴加濃硫酸1滴，觀察顏色變化。另取薯蕷浸液5ml，置于蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干，加入1ml醋酐溶液，并傾入比色盤(pán)中，（試管）沿管壁加入幾滴濃硫酸，觀察界面間是否有紫紅色環(huán)產(chǎn)生？
（4）氯仿-濃硫酸試驗(yàn)（Salkowski反應(yīng)）：取薯蕷醇浸液2ml，在水浴上蒸干，有氯仿1ml溶解，轉(zhuǎn)入干燥小試管中，沿壁小心加濃硫酸1ml，氯仿層顯紅或蘭色，硫酸層有綠色熒光，示含甾體皂苷。
注意事項(xiàng)：
采用比色法測(cè)定總皂苷含量時(shí)，
標(biāo)準(zhǔn)品可以選擇兩種或兩種以上進(jìn)行結(jié)果對(duì)比，取二者的平均值作為*終測(cè)定結(jié)果，使結(jié)果更具有意義。測(cè)定回收率時(shí)，也可以選擇兩種或兩種以上標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行對(duì)比檢測(cè)。
其他：
試驗(yàn)的操作采用比色法，并選擇酶標(biāo)儀處理數(shù)據(jù)，操作簡(jiǎn)便快捷，線性關(guān)系良好，并減少了用紫外分光光度計(jì)法操作時(shí)的大量時(shí)間，降低了時(shí)間對(duì)顯色結(jié)果的影響，穩(wěn)定性、精密度、重復(fù)性及回收率均達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求。
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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