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關(guān)于人源細(xì)胞系你了解多少?
閱讀次數(shù):167 發(fā)布時(shí)間:2023/4/10 10:05:00
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人源細(xì)胞系(通過選擇的永生細(xì)胞株,包括HeLa、OVCAR-3和LNCaP等常見癌癥細(xì)胞系),人源細(xì)胞系是一個(gè)統(tǒng)稱,實(shí)驗(yàn)室常用的有結(jié)腸癌腫瘤細(xì)胞系,該細(xì)胞系中可檢測到活躍的人源。

人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞系,衍化神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒,常用檢測步驟:
(1)將待檢血清用稀釋液從1:100開始作2倍連續(xù)稀釋,加入抗原孔,100μl/孔,同時(shí)設(shè)陰、陽性對照,37℃水浴1小時(shí);
(2)棄去血清,用洗滌液洗滌5~6次;
(3)加酶結(jié)合物,用稀釋液按工作濃度稀釋,100μl/孔,37℃水浴1小時(shí);
(4)棄去酶標(biāo)抗體,用洗滌液洗滌6次,甩干;
(5)加顯色液:于各反應(yīng)孔內(nèi)加A/B液各一滴,37℃,避光3~5分鐘;
(6)加終止液于每反應(yīng)孔,一滴/孔。

人源細(xì)胞系細(xì)胞來源主要有:
同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室可以傳承師兄師姐的細(xì)胞系。
搜集標(biāo)本,學(xué)習(xí)師兄師姐的成熟方法培養(yǎng)原代細(xì)胞。
或者通過各方面打聽,向別的實(shí)驗(yàn)室“化緣”而來。
另立門戶,滿尋找新的細(xì)胞。

細(xì)胞來源控制:
一般從各個(gè)來源獲得的細(xì)胞,換一個(gè)環(huán)境培養(yǎng)的時(shí)候都需要經(jīng)過一個(gè)磨合期。
原代細(xì)胞培養(yǎng)盡量不要傳太多代,不要輕易更換培養(yǎng)條件。
通常細(xì)胞系傳代培養(yǎng)幾代以后狀態(tài)會(huì)變好。如果狀態(tài)一直很差,可以通過觀察細(xì)胞形態(tài)等確定細(xì)胞是否老化、污染、凋亡等。

一般人源細(xì)胞系細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng):
1.傳代培養(yǎng)時(shí)要注意無菌操作并防止細(xì)胞之間的交叉污染,所有操作要盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每一種細(xì)胞使用一套器材,培養(yǎng)用液應(yīng)嚴(yán)格分開。
2.每天觀察細(xì)胞形態(tài),掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn):健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿,折光性好,生長致密時(shí)即可傳代。
3.如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象,應(yīng)立即采取措施,一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BSS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗,隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗菌素,并經(jīng)常更換培養(yǎng)基等。

原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

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