細胞培養(yǎng)實驗中用量*多的就是細胞
培養(yǎng)基，雖然細胞培養(yǎng)試驗基本技術(shù)大同小異，但是每種細胞的培養(yǎng)條件卻相差甚遠。若偏離某種細胞所需的培養(yǎng)條件，則會導(dǎo)致細胞表達不同的表型
因此，在實驗前，需要熟悉自己所使用的細胞系，并在實驗中嚴格遵守所有產(chǎn)品的操作說明。
在實驗過程中，作為實驗小白，我們應(yīng)該如何應(yīng)對相關(guān)問題呢？
首先，我們要如何挑選適合自己細胞生長的培養(yǎng)基呢？選擇培養(yǎng)基沒有確切的標(biāo)準，有幾點建議可供參考：
建立某種細胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細胞的培養(yǎng)基。可以查閱ATCC或在購買細胞株時咨詢供應(yīng)商。
根據(jù)細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養(yǎng)基。如小鼠細胞株多選RPMI1640。
其他實驗室慣用的培養(yǎng)基不妨一試，許多培養(yǎng)基可以適合多種細胞。
也可用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞，觀察其生長狀態(tài)，可以用生長曲線、集落形成率等指標(biāo)判斷，根據(jù)實驗室結(jié)果選擇*佳培養(yǎng)基，這是*客觀的方法，但比較繁瑣。
如何正確地保存培養(yǎng)基？普通的培養(yǎng)基放置在2-8℃冰箱避光保存，若已開封建議3周內(nèi)使用。未開封的培養(yǎng)基，一般可穩(wěn)定保存1年。
培養(yǎng)基中酚紅的作用是什么？導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色變化的原因有哪些？酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為pH值的指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。
培養(yǎng)基顏色變黃，原因有：培養(yǎng)基中細胞代謝產(chǎn)物為酸性，培養(yǎng)瓶受污染，細菌代謝產(chǎn)酸等導(dǎo)致。
培養(yǎng)基顏色偏暗紅色，原因有：培養(yǎng)基保存在4℃冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)的二氧化碳逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性，而培養(yǎng)基中的酸堿指示劑酚紅會隨著堿性增加而更偏暗紅。
我感覺自己的培養(yǎng)基污染了，這要怎么進行測試呢？取0.1ml液體培養(yǎng)基涂布到無菌
蛋白棟牛肉膏培養(yǎng)基上37℃培養(yǎng)24h，觀察有無雜菌生長（肉眼即可觀察到）。
如果我的培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，可長期保存嗎？一旦培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素，建議避光保存在4℃冰箱且在2周內(nèi)用完。因為一些抗生素和血清的基本成分在解凍后就開始降解了。
哇！我的培養(yǎng)基怎么有沉淀了，這是怎么回事？怎么預(yù)防處理沉淀？首先判斷培養(yǎng)基是否已經(jīng)污染，其次，若沉淀為絮狀沉淀則可能是加入血清引起的，此沉淀對細胞培養(yǎng)無影響。若沉淀為結(jié)晶，有可能是因為向培養(yǎng)基里加入的輔助試劑降低了培養(yǎng)基的溶解度，使一些無機鹽析出。
可應(yīng)用離心、過濾的方法去除這些沉淀，盡可能地減少血清凍融次數(shù)。
那我什么情況下可以使用不加酚紅的培養(yǎng)基呢？研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素（特別是雌激素）的作用。為避免固醇類反應(yīng)，培養(yǎng)細胞時，用不加酚紅的培養(yǎng)基；一些研究人員在做流式細胞檢測時，為了避免酚紅干擾檢測，也使用不加酚紅的培養(yǎng)基。
為什么培養(yǎng)基中會含有L-谷氨酰胺和丙酮酸鈉，它們的作用是什么？L-谷氨酰胺脫掉氨基后可作為培養(yǎng)細胞的能量來源參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源。盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是如果沒有葡萄糖的話，細胞也可以代謝丙酮酸鈉。
原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司
客服一
