技術(shù)文獻
在細胞培養(yǎng)的過程中,總是能遇到這樣的問題——細胞中有小黑點,一些難消化長得慢的細胞總會出現(xiàn)黑點,還有一些有漂浮的死細胞,崩解之后形成黑點和碎片,但還有一些是霉菌或細菌真菌類的污染也會形成小黑點,小黑點對細胞狀態(tài)和實驗效果等都有影響,怎么區(qū)別小黑點是細胞碎片,細胞核還是細菌等污染呢?這里我們先介紹一種稱之為黑膠蟲的細胞小黑點的污染特點及解決方案產(chǎn)品。
我們稱之為「黑膠蟲」及其分解復(fù)合物是一種常見的細胞污染物,其與細胞共生,隨細胞傳代而傳代,通常抗生素對其無效�!负谀z蟲」與細胞競爭性生長,對細胞生長不利,嚴重時導(dǎo)致細胞死亡。目前很多細胞存在被「黑膠蟲」污染的現(xiàn)象,對細胞培養(yǎng)及其后續(xù)實驗造成了極大地影響。
「黑膠蟲」污染的細胞有以下常見的特征:
1、黑膠蟲污染培養(yǎng)液不渾濁,但在顯微鏡下觀察細胞時,細胞周圍和培養(yǎng)液中有很多小黑點,且隨著細培養(yǎng)時間的延長小黑點逐漸增多,更換培養(yǎng)液或洗滌細胞不能將其去除;
2、黑膠蟲污染的細胞,營養(yǎng)消耗快,需要頻繁更換培養(yǎng)液;
3、黑膠蟲污染的細胞生長緩慢,細胞狀態(tài)差,空泡化嚴重,甚至還可能導(dǎo)致細胞形態(tài)的改變。
上海遠慕生物提供黑膠蟲細胞小黑點清除培養(yǎng)基,價格便宜實用,是細胞培養(yǎng)的好幫手,包括:1640,DMEM 高糖,DMEM 低糖,MEM 等含 10%PBS 或各細胞生長因子的培養(yǎng)基,詳情咨詢我公司�!负谀z蟲」清除培養(yǎng)基是本公司開發(fā)的新一代產(chǎn)品,含有清除「黑膠蟲」的特殊成分。產(chǎn)品經(jīng)過了上百種細胞的測試和長期的實驗驗證,對細胞無害,對清除「黑膠蟲」污染效果顯著,能夠很好的殺滅和抑制「黑膠蟲」。
產(chǎn)品使用方法
1、根據(jù)所培養(yǎng)細胞的特性,將「黑膠蟲」清除基礎(chǔ)培養(yǎng)基配制成相應(yīng)的完全培養(yǎng)基。
2、將 50~100 萬個細胞鋪到 60 mm 的細胞培養(yǎng)皿內(nèi),加入 4 ml「黑膠蟲」清除完全培養(yǎng)基孵育細胞,(也可以與細胞正常培養(yǎng)方法相同,直接將「黑膠蟲」清除完全培養(yǎng)加入到培養(yǎng)器皿中孵育細胞)。
3、次日更換新鮮的「黑膠蟲」清除完全培養(yǎng)基,并更換新的培養(yǎng)器皿;之后每 2~3 天更換 1 次培養(yǎng)液,換液時用無菌的平衡鹽溶液洗滌細胞 1~2 次;期間如果細胞密度過大,請保持細胞密度適當(貼壁細胞可能需要用胰酶消化)。
4、使用「黑膠蟲」清除培養(yǎng)基 3 天之后即可見清除效果,連續(xù)使用 12~14 天即可將「黑膠蟲」清除,若「黑膠蟲」污染較為嚴重,可延長處理 3~5 天。
5、因環(huán)境中可能依然存在污染源,為避免細胞再次受到「黑膠蟲」的污染,建議您在「黑膠蟲」清除以后繼續(xù)使用「黑膠蟲」清除培養(yǎng)基,以達到預(yù)防的效果。
黑膠蟲清除培養(yǎng)基注意事項
1. 收到產(chǎn)品后首先檢查包裝是否完好,培養(yǎng)基瓶是否有破損,培養(yǎng)基是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若
有上述現(xiàn)象發(fā)生,請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀產(chǎn)品說明書,了解產(chǎn)品相關(guān)信息,如使用方法、保存方式、有效期等,確保操作方式與
產(chǎn)品說明書相一致。若因操作方式與產(chǎn)品說明不一致而導(dǎo)致出現(xiàn)的問題,責任由客戶自行承擔。
3. 檢查確認產(chǎn)品無任何問題后,如果不立即使用,請將產(chǎn)品及時放入 2℃~8℃ 中,避光保存。
4. 本產(chǎn)品經(jīng) 0.22μm 過濾除菌,使用本產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
5. 本產(chǎn)品僅供研究或進一步生產(chǎn)使用,不用于診斷或治療。
原創(chuàng)作者:上海遠慕生物科技有限公司
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