技術(shù)文獻
在細胞培養(yǎng)的時候,有時會在400倍顯微鏡下看到小黑點在做布朗運動,小黑點有時呈點狀,有時呈小的片狀,目前業(yè)內(nèi)稱之為黑膠蟲。黑膠蟲污染一般來源于血清當中,在細胞培養(yǎng)的過程中,黑膠蟲會隨細胞的傳代而傳代,其數(shù)量會不斷增多,并且會與細胞競爭培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)。
在黑膠蟲污染的早期對細胞并沒有什么影響,但當黑膠蟲的數(shù)量達到一定程度時,細胞就會因營養(yǎng)不足而死亡,嚴重影響科研活動的開展和進行。
有黑膠蟲了怎么辦?
小編搜集了以下幾種辦法:
換好一點的血清
如果是貼壁細胞的話,可用無菌的PBS洗幾次,可一定程度上緩解。若是懸浮的話,可以向其中少加一點滋養(yǎng)細胞。加滋養(yǎng)細胞對有黑膠蟲的剛復蘇的細胞很有效!還有就是實驗環(huán)境要注意好,保持細胞間整個環(huán)境的潔凈度。
換用進口的一次性塑料培養(yǎng)瓶。
建議清理無菌室所有物品,重新滅菌,用KMnO4熏蒸,按首次使用無菌室做,細胞重新復蘇。
在換液前先加入生理鹽水并輕輕拍打,沖洗干凈后再加入培養(yǎng)液,堅持天天洗,傳代時加生理鹽水再離心一次,接種密度稍大一些,蟲子就會些許減少,對細胞的生長也不會有大的影響。
有材料稱minocycline具有一定的作用,可以和換液結(jié)合起來使用。
7.加入黑膠蟲去除劑CleanIt,只需將試劑將入培養(yǎng)基,便可輕輕松松與黑膠蟲說再見。
原創(chuàng)作者:上海遠慕生物科技有限公司
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