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技術(shù)文獻(xiàn)

人酸性磷酸酶(ACP)ELISA檢測(cè)試劑盒使用注意事項(xiàng)
閱讀次數(shù):848 發(fā)布時(shí)間:2017/11/27 10:00:23
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    上海遠(yuǎn)慕提供各種ELISA檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù),elisa試劑盒代測(cè)選擇上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司,本司是國(guó)內(nèi)ELISA試劑盒優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商,專業(yè)供應(yīng)進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒,培養(yǎng)基,抗體,標(biāo)準(zhǔn)品,化學(xué)試劑,動(dòng)物血清,染色液,細(xì)胞株等,ELISA試劑盒種屬涵蓋大鼠,小鼠,植物,人,豚鼠,雞,兔,豬,牛,馬,狗及其他動(dòng)物,歡迎來電咨詢!


    人酸性磷酸酶(ACP)ELISA檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品簡(jiǎn)介:


    中文名:人酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒


    供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕


    規(guī)格:48t/96t


    保存:2-8℃


    有效期:6個(gè)月


    適用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床


    主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等


    應(yīng)用領(lǐng)域: 僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷


    特異性:檢測(cè)天然或者重組,與其它蛋白與交叉反應(yīng)


    ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。


    預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。


 



    人酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒技術(shù)原理:


    (1)。 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。


    (2)。 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。


    (3)。 酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。


    (4)。 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。


    (5)。 此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。


    (6)。 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。


    人酸性磷酸酶(ACP)ELISA檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè) 人酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒樣本處理及要求:


    1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。


    2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。


    3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。


    4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


    5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。


    6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。


    7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。


 



    人酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒液體類標(biāo)本:


    包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。


    1)血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


    2)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


    3)尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。


    4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


    5)組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。


    人酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):


    專一性強(qiáng):抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測(cè)的對(duì)象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。


    靈敏度高:由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測(cè)的靈敏性,使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法。


    樣品易保存:經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。


    人酸性磷酸酶(ACP)ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):


    1.不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的不確定性。


    2.若不同批號(hào)人ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。


    3.反應(yīng)時(shí)間的誤差,做大量標(biāo)本時(shí),孔和*后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。


    4.臨界值附近標(biāo)本波動(dòng)為正,F(xiàn)象,任何試劑均不可避免。可以考慮將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。


    5.加樣時(shí)樣品量誤差,對(duì)于陰或很陽的標(biāo)本影響不大,但對(duì)閾值附近的標(biāo)本影響極大,建議校對(duì)加樣器。

原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

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