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    中文名：植物赤霉素（GA）elisa試劑盒

    別名：植物赤霉素（GA）ELISA Kit

    供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕

    規(guī)格：48t/96t

    保存：2-8℃低溫保存

    有效期：6個月

    適用范圍：僅限科研實(shí)驗(yàn)，不作臨床使用。

    用途：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。

    特點(diǎn)：敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。

    特異性：本試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。

    植物赤霉素（GA）ELISA檢測試劑盒預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。


 

    ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。

    引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：

    ①標(biāo)本因素；

    ②試劑因素；

    ③操作因素。

    植物赤霉素（GA）ELISA檢測試劑盒試劑組成

    植物赤霉素（GA）ELISA試劑盒若干特點(diǎn)：

    專一性強(qiáng)：抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng)，而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標(biāo)記了酶以外，與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。

    靈敏度高：由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應(yīng)，顯示抗原與抗體的結(jié)合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。

    樣品易保存：經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。

    植物赤霉素（GA）ELISA檢測試劑盒液體類標(biāo)本要求：

    包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

    1）血清：

    室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

    2）血漿：

    應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

    3）尿液：

    用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

    4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：

    檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/ 分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

    5）組織標(biāo)本：

    切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩��?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

    植物赤霉素（GA）ELISA試劑盒包含以下各組分：

    （1）結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；

    （2）洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；

    （3）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；

    （4）酶的底物；

    （5）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），ELISA試劑盒參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測定中）；

    （6）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；

    植物赤霉素（GA）ELISA檢測試劑盒操作流程：

    1，試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。

    2，實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

    3，不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。

    4，使用一次性的吸頭以免交叉污染，避免使用帶金屬部分的加樣器。

    5，使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

    6，洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

    7，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。

    8，嚴(yán)格按照說明書的操作方法進(jìn)行操作。說明書以英文說明書為主。

    植物赤霉素（GA）ELISA檢測試劑盒預(yù)期應(yīng)用注意事項：

    1.不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同，務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作，否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性。

    2.若不同批號EILSA試劑盒的不同組分（A液或酶工作液），或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用，有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高，花板等情形。

    3.反應(yīng)時間的誤差，做大量標(biāo)本時，孔和*后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。

    4.臨界值附近標(biāo)本波動為正�，F(xiàn)象，任何試劑均不可避免�？梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。

    5.加樣時樣品量誤差，對于陰或很陽的標(biāo)本影響不大，但對閾值附近的標(biāo)本影響極大，建議校對加樣器。

    植物赤霉素（GA）ELISA檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)方法：

    1、加入待測標(biāo)本每孔0.05ml，并設(shè)HBsAg陽性對照2孔，HBsAg陰性對照2孔，空白對照1孔，然后加入酶結(jié)合物每孔1滴（0.05ml、空白對照孔不加），充分混勻后置37℃孵育30分鐘。

    2、洗板：棄去反應(yīng)條孔內(nèi)液體、拍干、用洗滌液注滿每孔，棄去拍干，反復(fù)五次后拍干。

    3、顯色劑：先加顯色劑A每孔1滴（0.05ml），然后再加顯色劑B每孔1滴（0.05ml），混勻，37℃孵育10分鐘。

    4、每孔加終止液1滴（0.05ml），混勻。

    注意事項：

    1、試劑盒置2℃～8℃保存。

    2、使用前試劑應(yīng)搖勻，并棄去1～2滴后垂直滴加。

    3、從冷藏環(huán)境中取出試劑盒內(nèi)全部瓶裝試劑及待測標(biāo)本所需微孔條，置室溫平衡30分鐘后再行測試，余者應(yīng)及時封存于冰箱中以備后用。

    植物赤霉素（GA）ELISA試劑盒標(biāo)本采集及保存：

    1、 新鮮植物組織請在液氮中充分研磨；

    2、 加進(jìn)樣品體積3倍的提取液（10% TCA）， 置于-20 過夜；

    3、 請于4 ，8000rpm，離心1小時，棄上清，收集沉淀；

    4、 沉淀加進(jìn)等體積的冰浴丙酮，混勻后于4 離心（8000rpm，15分鐘），棄上清并真空干燥，保存?zhèn)溆茫?/p>

    5、 上樣前加進(jìn)裂解液（2.7g 尿素，0.2g CHAPS，溶于往離子水中至終體積5ml），混勻后室溫放置30分鐘，然后4 離心（8000rpm，15分鐘），取上清并暫時保存于4 待用。

    注：以上標(biāo)本均應(yīng)密封保存，4 保存應(yīng)小于1周，-20 不應(yīng)超過1個月，-80 不應(yīng)超過2個月

原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司