接下來,上海遠(yuǎn)慕為您解惑,為您說明蘇木素-伊紅染色的基本原理。
先說說蘇木素吧,蘇木素是*早用于生物學(xué)上的天然染色劑,百余年來,一直是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室*常用的組織學(xué)中細(xì)胞核的染料,它是從蘇木樹的樹心中提煉出來的,為淺褐色結(jié)晶或淡黃褐色的粉末狀物。易溶于乙醇、甘油,也可溶于熱水。蘇木素本身沒有染色能力,它經(jīng)過氧化后,能產(chǎn)生具有染色能力的蘇木紅,蘇木紅又稱為氧化蘇木素或蘇木因。
蘇木素變成蘇木紅的過程叫作“成熟”。成熟的方法一般有兩種:一種是把配制好的蘇木素液在開口瓶中放置兩個(gè)月以上,讓其在日光和空氣中的氧的作用下使之氧化。故一般地盛蘇木素的瓶子放在向陽處,時(shí)間愈長(zhǎng),染色的效果愈好。常配制一大瓶,備長(zhǎng)期使用。另一種方法是在蘇木素液中加入氧化劑,如磺酸鈉,過錳酸鉀,,雙氧水等。用這種方法成熟與用種方法者不同的是,它放置時(shí)間愈長(zhǎng),染色的效果愈低。這是因?yàn)樘K木紅被繼續(xù)氧化可生成無色的化合物,故一次不宜配制過多,還應(yīng)放置40C冰箱內(nèi)避光保存以延長(zhǎng)使用時(shí)間。它的優(yōu)點(diǎn)是配制后即可使用。
成熟的蘇木素對(duì)組織并無親和力,須加入含金屬離子的媒染劑,才能達(dá)到染色的目的。一般用于明礬蘇木素的媒染劑為鉀明礬或氨明礬。主要是利用明礬中的鋁離子和蘇木紅結(jié)合形成的鋁沉淀色素為紫藍(lán)色,對(duì)染色質(zhì)有很大的親和力,水和酒精都不能使其褪色。用于鐵蘇木素的媒染劑是三價(jià)鐵離子,蘇木紅的鐵沉淀色素為黑藍(lán)色,不溶于水,因此,故不能配制大量含媒染劑的混合液,一般用時(shí)現(xiàn)配,或在染色過程中,先用鐵明礬媒染,然后再染蘇木素,如磷鎢酸蘇木素染色即是。
常規(guī)蘇木素染色的對(duì)比染色是用伊紅,也有采用焰紅,因?yàn)檠婕t比伊紅色澤更鮮明,此外還有采用橘黃G,比布里希猩紅,波爾多紅等作為對(duì)比染色。
蘇木素-伊紅染色,在組織病理學(xué)中,是一種日常使用*為廣泛的常規(guī)染色方法。一張優(yōu)質(zhì)的染色切片,可以清晰地觀察到各種不同的組織結(jié)構(gòu)以此作為病理診斷的確切依據(jù)。再根據(jù)此染色切片所見,分別進(jìn)行不同的特殊染色。
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