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技術(shù)文獻(xiàn)

遠(yuǎn)慕交流:臨床生化試劑檢測(cè)中的各種交叉污染研究
閱讀次數(shù):515 發(fā)布時(shí)間:2017/5/15 9:52:07
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    類(lèi):前一測(cè)試項(xiàng)目試劑中含有緊跟其后測(cè)試項(xiàng)目所要測(cè)定的底物。此時(shí)殘留的污染物被帶入下一測(cè)試中,與該測(cè)試的試劑反應(yīng),可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果異常。引起這類(lèi)交叉污染產(chǎn)生的物質(zhì)明確,并且可以定量分析。主要項(xiàng)目有:
    1. ALT(IFCC法),AST(IFCC法)含高活性的LDH,會(huì)影響其后的LDH結(jié)果。

    2. CK-NAC、CK-MB-NAC酶偶聯(lián)測(cè)定試劑含高濃度Glucose,會(huì)干擾其后的血糖測(cè)定,尤其對(duì)HK法干擾嚴(yán)重。

    3. Glu(GOD法)、UA(尿酸酶法)、a-HBDH、TG、Ca(偶氮胂III法)、TC(CHOD- PAP)等均采用磷酸鹽緩沖液,會(huì)干擾位于其后無(wú)機(jī)鹽(P)的結(jié)果。

    4. ALP(IFCC-AMP法),CK-NAC,CK-MB-NAC,TG(GPO法)試劑均含高濃度Mg2+會(huì)影響緊隨其后的Mg2+的結(jié)果。

    5. TC、HDL-C、HDL-C、LDL-C采用膽固醇氧化酶法的試劑含膽酸鈉,會(huì)干擾緊跟其后的TBA結(jié)果,致假性偏高。

    6. 以4NP-G4為底物的AMY試劑含Ca2+濃度高會(huì)影響其后測(cè)Ca2+的準(zhǔn)確性。

    7. TG,TC試劑中有LIP,會(huì)導(dǎo)致LIP的測(cè)試結(jié)果不真實(shí)。

    該種類(lèi)型的交叉污染單試劑終點(diǎn)法的受污染項(xiàng)目測(cè)試結(jié)果的抬高或降低反映的是攪拌桿的攜帶污染。因?yàn)樵噭┽様y帶進(jìn)來(lái)的上一個(gè)測(cè)試的干擾物會(huì)和下一個(gè)試劑發(fā)生反應(yīng),由于攜帶量小,一般在試劑空白段(2min)即反應(yīng)平衡。而雙試劑項(xiàng)目的測(cè)試結(jié)果反映的是試劑針和攪拌桿的綜合污染。

    第二類(lèi):前一測(cè)試項(xiàng)目試劑中的某種(些)成份干擾緊隨其后測(cè)試項(xiàng)目所要測(cè)定的底物。引起這類(lèi)交叉污染產(chǎn)生的物質(zhì)明確,但和類(lèi)不同的是,前一測(cè)試殘留并帶入下一測(cè)試的污染物并非待測(cè)物本身,而是能與待測(cè)物進(jìn)行其他的反應(yīng)或顯色物質(zhì)波段重疊或引起測(cè)試條件的變化如PH值改變等,從而帶來(lái)對(duì)測(cè)試過(guò)程的干擾,這種干擾作用不易進(jìn)行定量分析。主要項(xiàng)目有:

    1. TC、HDL-C、HDL-C、LDL-C*終反應(yīng)都是過(guò)氧化氫和4-氨基安替比林在過(guò)氧化酶的作用下產(chǎn)生醌亞胺顯色(505nm),因此這些項(xiàng)目間會(huì)相互干擾。

    2. TP的檢測(cè)原理是蛋白質(zhì)與銅離子生成紫藍(lán)色復(fù)合物,該顯色物質(zhì)在546nm有吸收峰,在波段500nm~600nm都有較大吸收;因此TP試劑可能影響500nm -600nm波段的終點(diǎn)法顯色測(cè)定(如TC,TG,UA等)。另外,TBIL(重氮法)和DBIL(重氮法)生成的偶氮物在546 nm下有吸收峰,因此TBIL(重氮法)或D-BIL(重氮法)會(huì)和TP相互干擾。

    3. ALB(BCG)檢測(cè)原理是形成的藍(lán)綠色復(fù)合物在578nm有強(qiáng)吸收,且在整個(gè)500nm-700nm都有較強(qiáng)吸收,因此ALB試劑會(huì)干擾緊隨其后的500nm-700nm波段的終點(diǎn)法顯色測(cè)定(如UA等)。

    4. ALT的R2(含NADH)及 CR的R2試劑(苦味酸,呈深黃色)在340nm有很強(qiáng)的吸收,會(huì)干擾緊隨其后的340nm免疫比濁終點(diǎn)法的測(cè)定(如PA,CRP等),且免疫比濁法的終點(diǎn)吸光度越低干擾越嚴(yán)重。

    該種類(lèi)型的交叉污染無(wú)法分出是試劑針還是攪拌桿攜帶進(jìn)的污染對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響,是兩者的綜合影響。

    另外一些文獻(xiàn)報(bào)道:

    ALT、AST、CK、CK-MB、Glu(GOD法和HK法)對(duì)TG有影響;

    P對(duì)UA、CREA、D-bil(釩酸鹽法)、D-bil(重氮法)有影響;

    Glu(HK)、UA、UREA、CREA(JAFF)、TP對(duì)Ca有影響;

    TP對(duì)Mg有影響;

    CK、CK-MB、UA對(duì)P有影響。

    TC、TG、HDL-C、LDL-C、Glu(GOD)、CREA(酶法)、UA反應(yīng)過(guò)程中有H2O2,ALT、AST、CK、LDH、CK-MB、a-HBDH 、Glu(HK)、UREA反應(yīng)過(guò)程中有NADH,兩類(lèi)反應(yīng)間可能發(fā)生氧化還原反應(yīng)從而產(chǎn)生影響。

    Mg試劑中含有EGTA,對(duì)Ca有影響。

    CK、CK-MB中含有EDTA,對(duì)Ca、Mg有影響。

    a-HBDH中含有碳酸鹽,對(duì)Ca有影響。

    CK、CK-MB中含有EDTA能螯合ALP試劑中的Mg離子,從而影響ALP的檢測(cè)。

原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

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