上海遠慕：常用HE染色試劑有哪幾種配制方法？
一、蘇木素
（1） Harris蘇木素液
配方：
蘇木精1 g ；無水乙醇10 ml；蒸餾水200 ml；鉀明礬20g；HgO 0.5 g
先將蘇木精溶于無水乙醇中，備用。把明礬放入蒸餾水，加熱溶解，再加入備用的蘇木精，煮沸 2 分鐘，先加入極少量的（紅色、黃色均可），防止氧化過程中液體劇烈沸騰外溢（選用比配制容積大一倍燒杯，燒杯比三角燒瓶更不容易外溢），玻棒攪拌，然后，邊攪拌邊加入。一定要注意開始時只能一點點加，直到液體不再劇烈沸騰了，才能增加加入的量，直至加完。加入所用的時間和溶解的程度、電爐的功率是此配方的關(guān)鍵，也是各人配出來染色效果各不相同的原因，具體要根據(jù)每人的習(xí)慣進行調(diào)整，同時也要根據(jù)氣溫而適當(dāng)改變加熱的時間，加熱時間越長，氧化越快。加完后，立即移至冰水中，加速其冷卻，靜置一夜后，過濾。用前以 5% 的比例加入冰乙酸。如配好后時間較長，冰乙酸的量可適當(dāng)多加一點。冰乙酸的量，可直接影響蘇木素的著色能力和清晰度。加少了，會造成核漿共染，背景不干凈；加多了，核著色能力下降。此液可放置3月至半年左右。
（2）Gill改良蘇木素液：
蘇木精2g；無水乙醇250 ml；硫酸鋁 17.6 g；蒸餾水750 ml；碘酸鈉0.2 g；冰乙酸20ml
先將蘇木精溶于無水乙醇，硫酸鋁溶于蒸餾水，然后兩液混合后加入碘酸鈉，*后加入冰乙酸。此液為半氧化進行性蘇木素液，不會產(chǎn)生沉淀，氧化膜少，從理論上說染色不需要分化，但如果適當(dāng)深染分化，染色效果更好。
配制此染液的關(guān)鍵在于碘酸鈉的量。一、要根據(jù)季節(jié)氣溫的改變，適當(dāng)調(diào)整碘酸鈉的量，配方里碘酸鈉的量一般只適用于夏天（室溫25度），隨著氣溫降低，氧化速度降低，可適當(dāng)增加碘酸鈉的量，室溫每下降1度，碘酸鈉增加0.01，*多不能超過總量的50%，過量的碘酸鈉可使蘇木素過氧化，不僅容易壞，而且核漿共染。二、稱量一定要準(zhǔn)確，很多單位配此染液總是染不上或染的很慢，主要是天平的精確度差，選擇*小稱量度在10mg以下的天平。三、應(yīng)該觀察碘酸鈉是否在有效期內(nèi)，是否潮解。
（3）Ehrlich蘇木素液：
蘇木精2g；無水乙醇100 ml；甘油100 ml；冰乙酸10 ml； 鉀明礬2-3 g；蒸餾水100 ml
先將蘇木精溶于無水乙醇，加甘油和冰乙酸待用。然后把鉀明礬溶于蒸餾水，再注入待用的蘇木精液，用玻棒攪勻，輕蓋瓶口（可用棉花），置于日光下，經(jīng)常開啟瓶口并搖勻，約二個月后，顏色變褐色即可使用。
（4）Mayer改良蘇木素液：
蘇木精2g；無水乙醇40 ml；硫酸鋁鉀100g；蒸餾水600 ml；碘酸鈉0.4g；冰醋酸20ml
稍加熱將硫酸鋁鉀溶于蒸餾水中，同時將蘇木精溶無水乙醇， 再將二液混合，加入碘酸鈉，充分溶解。此液也是進行性蘇木素液，從理論上說染色不需要分化，但如果適當(dāng)深染分化，染色效果更好。注意事項與Gill改良蘇木素液相同。
二、伊紅
（1）曙紅（水溶性）
配方：曙紅 （水溶性）2.5 g；蒸餾水500 ml
水溶性依紅酸化配制：
將曙紅溶于蒸餾水中，然后加濃鹽酸10毫升，充分?jǐn)嚢�，靜置過夜后過濾。過濾后的沉淀用蒸餾水沖洗二次，再過濾；將沉淀物連同濾紙一起放入溫箱內(nèi)干燥，加95%乙醇1000毫升，配成飽和液。使用前再用95%的乙醇 1:1～2倍稀釋，加入1～2%冰乙酸。
（2）伊紅（醇溶性）
配方： 伊紅 （醇溶性）；2.5 g 95%乙醇；1000 ml
*后加入冰乙酸幾滴，起到促染作用。目前，國內(nèi)依紅偏酸，不僅不需要加冰醋酸，而且根據(jù)胞漿的等電點為pH4.7-5.0，應(yīng)該用當(dāng)量NaOH或冰醋酸將依紅染液調(diào)至pH4.5左右。
三、鹽酸乙醇分化液：
濃鹽酸0.5～1 ml；75%乙醇99 ml
四、清洗液：
30%鹽酸或者用5%苯酚水
溶液浸泡24小時，取出后充分水洗。此法可用于蓋玻片或載玻片處理。
五、當(dāng)量鹽酸：
配制1N的HCL 1000 ml ，需濃HCL多少ml ？
原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司
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