酶聯(lián)免疫（ELISA）試劑盒操作注意問題：
酶聯(lián)免疫（ELISA）試劑盒是比較快捷方便的藥物殘留檢測方法，但對實(shí)驗(yàn)操作條件的要求比較嚴(yán)格，實(shí)驗(yàn)條件主要有兩方面組成：
1、實(shí)驗(yàn)室的操作環(huán)境（但而elisa試劑盒對實(shí)驗(yàn)室操作環(huán)境的要求是幾種藥物殘留檢測方法中相結(jié)較低的）
2、操作人員的操作熟練程度：由于大部分的試驗(yàn)操作步驟都是由實(shí)驗(yàn)人員來完成的，人為的誤差相對嚴(yán)重一些。
下面所介紹的內(nèi)容是進(jìn)行Elisa操作時應(yīng)該注意的問題，僅供參考，詳情來電咨詢！
酶聯(lián)免疫試劑盒操作的通用規(guī)則：
1、要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性，可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定（由于蒸餾水不含雜質(zhì)，溫度環(huán)境為20℃左右時，1ml的水可以看作是1g，200ul的水可以看作是0.2g），每一把微量加樣器都應(yīng)該將其量程和量程進(jìn)行確定。
2、在使用微量加樣器時，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭，即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3、吸取液體時速度不且太快，以免產(chǎn)生氣泡，吸取的量不夠準(zhǔn)確。
4、將液體加到酶標(biāo)孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭的液體和孔壁接觸，液體會自然流下去。吸入液體時的方法是吸兩檔打一檔，防止由于槍頭的毛細(xì)作使得部分液體不能流出而造成誤差。
5、吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸，減少誤差。
6、液體全部加入酶標(biāo)孔后，將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s，使液體充分混合均勻，也使其得到充分的反應(yīng)。
7、孵育時要使蓋板膜封好酶標(biāo)板，防止水分蒸發(fā)，以防曲線不成線形。
8、實(shí)驗(yàn)前半個小時將試劑從冰箱中取出，使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同。（酶標(biāo)板只要取出需要量）
9、由于底物顯色劑對光及其敏感，因此要避光保存。
10、手工洗板時每次加入洗滌液后，應(yīng)靜置15-30s，不要將一個酶標(biāo)孔中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中，防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
11、檢測吸光值前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開，將其預(yù)熱30min以上。
12、底物為TMB，避免與皮膚相接觸。終止液為2mol的濃硫酸，具有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸皮膚。
13、孵育時間應(yīng)嚴(yán)格按照試劑盒說明書上的時間為準(zhǔn)。
14、要盡量做雙孔實(shí)驗(yàn)，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，又能反映出試劑盒的精密度。
15、沒有去離子水或雙蒸水時，可以使用娃哈哈純凈水配制溶液，切勿使用自來水。
16、不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同，所以務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作，否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性。且同一廠家不同批次的產(chǎn)品也不能交叉使用。
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
客服一
