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技術(shù)文獻(xiàn)

抗壞血酸(Vc)測(cè)試盒說明書
閱讀次數(shù):708 發(fā)布時(shí)間:2016/5/10 11:10:57
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抗壞血酸(Vc)測(cè)試盒說明書

一、試劑盒組成及配置(50T/48樣)

   試劑一:貯備液5mlx1瓶,4℃保存6個(gè)月。
   試劑一應(yīng)用液配制:用時(shí)按照試劑一貯備液:雙蒸水=1:14稀釋,混勻制備
   試劑二:粉劑x1支,4℃保存6個(gè)月。
   試劑二應(yīng)用液配制:用時(shí)一支粉劑加0.36ml冰醋酸再加水至40ml,溶解,4℃保存。
   試劑三:白色結(jié)晶體粉劑x1支,4℃保存6個(gè)月。
   試劑三應(yīng)用液配制:因膠南溶解,用前2-4小時(shí)加95%乙醇或無水乙醇60ml充分溶解,制備,4℃保存。
   試劑四:黃色貯備液0.2mlx1瓶,冰箱4-8℃避光保存,貯存時(shí)間6個(gè)月。
   試劑四應(yīng)用液配制:用時(shí)取0.15ml試劑貯備液加水至25ml制備,F(xiàn)用現(xiàn)配
   試劑五:液體6mlx1瓶,4℃保存6個(gè)月。
   試劑六:Vc標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑6mgx3支,每瓶?jī)?nèi)含維生素C,4℃保存6個(gè)月。60ug/ml Vc標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液的配制:將1支標(biāo)準(zhǔn)品粉劑溶于10ml試劑一應(yīng)用液中,制備。6ug/ml Vc標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用的配制:取60ug/ml Vc標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液再用試劑一應(yīng)用液10倍稀釋備用,現(xiàn)用現(xiàn)配。

注:維生素C標(biāo)準(zhǔn)品易氧化,因此在樣本上清液制備好后在配標(biāo)準(zhǔn),并在10分鐘內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。     
                                                                                         
二、操作過程
   1、上清液制備:取樣本0.15ml加1號(hào)試劑0.45ml,旋渦混勻,放置15分鐘后離心,3500~4000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,上層清亮液體為上清液。

   2、上清液中Vc的測(cè)定:

 
空白管
標(biāo)準(zhǔn)管
測(cè)定管
試劑一(mL)
0.4
 
 
6ug/ml Vc標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液(ml)
 
0.4
 
上清液(ml)
 
 
0.4
試劑二應(yīng)用液(ml)
0.5
0.5
0.5
試劑三(ml)
1
1
1
試劑四(ml)
0.25
0.25
0.25
充分混勻,37℃水浴30分鐘
試劑五
0.1
0.1
0.1
充分混勻,靜置10分鐘,波長(zhǎng)636nm,1cm或者0.5cm光徑,雙蒸水凋零,測(cè)定各管吸光度值。

原創(chuàng)作者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

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