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技術(shù)文獻

微量分光光度計和普通分光光度計的區(qū)別
閱讀次數(shù):330 發(fā)布時間:2022/12/6 9:58:16
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傳統(tǒng)分光光度計:
1、樣品體積要求大,絕大部分要50μL以上
2、需使用比色皿
3、每次換樣品時,比色杯需要清洗,工作繁重
4、光程一般為10mm,樣品需要稀釋,測量濃度范圍小
5、燈源一般由氘燈(紫外)和鎢燈(可見)組成,壽命短
6、需要預(yù)熱半個小時以上
7、顯示吸光度值,不顯示濃度值
8、儀器體積大,質(zhì)量重

微量分光光度計:
1:所需樣品體積小,僅需1~2μL
2:不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測平臺上,測量時樣品會自動形成液柱
3:只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測平臺上擦拭干凈即可
4:具有1mm和0.2mm兩個光程(由電磁閥調(diào)節(jié)),樣品無需稀釋,測量范圍可達到常規(guī)分光光度計的50倍
5:氙氣閃光燈為燈源,壽命長,性能穩(wěn)定
6:不需要預(yù)熱,可隨時檢測
7:顯示吸光度值的同時,程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料)
8:體積。21cm×17cm×11cm ),質(zhì)量輕(1.35kg)

常見分光光度計種類及區(qū)別
分光光度計是一種分析測量光譜的儀器,因為應(yīng)用需求的不同,分光光度計有著不同的種類。分光光度計按照波長及應(yīng)用域的不同可以分為:

(1)可見光分光光度計
(2)紫外分光光度計
(3)紅外分光光度計
(4)熒光分光光度計
(5)原子吸收分光光度計。

現(xiàn)生命科學(xué)域比較流行的超微量分光光度計是屬于紫外分光光度計的一種。

(1)可見分光光度計

用來測量待測物質(zhì)對可見光(400~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計。可在600nm測定細菌細胞密度。

(2)紫外可見分光光度計

紫外可見分光光度計用來測量待測物質(zhì)對可見光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器?梢詼y定核酸和蛋白的濃度,也可以測定細菌細胞密度。紫外分光光度計又可分為單光束,假雙光束,雙光束。它們的用途又有區(qū)別。

a) 單光束:適于在給定波長處測量吸光度或透光度,一般不能作全波段光譜掃描,要求光源和檢測器具有很高的穩(wěn)定性。
b) 雙光束:自動記錄,快速全波段掃描?上庠床环(wěn)定、檢測器靈敏度變化等因素的影響,特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜,價格較高。
c) 假雙光束也就是比例雙光束,它的原理是由同一單色器發(fā)出的光被分成兩束,一束直接到達檢測器,另一束通過樣品后到達另一個檢測器。這種儀器的優(yōu)點是可以監(jiān)測光源變化帶來的誤差,但是并不能消除參比造成的影響。
 
(3)紅外分光光度計

一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機化合物常用的光譜區(qū)域,能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣。

紅外光譜法的特點是:快速、樣品量少(幾微克-幾毫克),特征性強(各種物質(zhì)有其特定的紅外光譜圖)、能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣以及不破壞樣品。
 
(4)熒光分光光度計

熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。應(yīng)用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學(xué)實驗等域。

通過對這些參數(shù)的測定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。
(5)原子吸收分光光度計
 
該法主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規(guī)儀器。是材料分析及質(zhì)量控制部門進行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。

以上幾種常見的分光光度計種類區(qū)別便是本文為大家介紹的內(nèi)容,希望大家能夠在了解之后更好的運用分光光度計。

原創(chuàng)作者:上海遠慕生物科技有限公司

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