微生物的生長(zhǎng)，除了受本身的遺傳特性決定外，還受到許多外界因素的影響，如營(yíng)養(yǎng)物濃度、溫度、水分、氧氣、pH等。微生物的種類不同，培養(yǎng)的方式和條件也不盡相同。
微生物是不能脫離水而生存的。但是微生物只能在水溶液中生長(zhǎng)，而不能生活在純水中。各種微生物在不能生長(zhǎng)發(fā)育的水分活性范Χ內(nèi)，均具有狹小的適當(dāng)?shù)乃只钚詤^(qū)域。
在生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)內(nèi)，微生物都能生長(zhǎng)，但生長(zhǎng)速率不一樣。微生物只有處于適生長(zhǎng)溫度時(shí)，生長(zhǎng)速度才快，用時(shí)短。超過-低或-高生長(zhǎng)溫度，微生物不會(huì)生長(zhǎng)，甚至?xí)劳觥?/div>
一般情況下，微生物的生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)是恒定的。但也常受其它環(huán)境條件的影響而發(fā)生變化。根據(jù)微生物適生長(zhǎng)溫度的不同，可將它們分為三個(gè)類型：
a.嗜冷微生物：其適生長(zhǎng)溫度多數(shù)在-10℃－20℃之間
b.中溫微生物：其適生長(zhǎng)溫度一般在20℃－45℃之間
c.嗜熱微生物：生長(zhǎng)溫度在45℃以上。
（3）營(yíng)養(yǎng)物濃度
細(xì)菌的生長(zhǎng)率與營(yíng)養(yǎng)物的濃度有關(guān):μ=μmax*C/（K+C） ，營(yíng)養(yǎng)物濃度與生長(zhǎng)率的關(guān)系曲線是典型的雙曲線。
K值是細(xì)菌生長(zhǎng)的很基本的特性常數(shù)。它的數(shù)值很小，表明細(xì)菌所需要的營(yíng)養(yǎng)濃度非常之低。
然而營(yíng)養(yǎng)太低時(shí)，細(xì)菌生長(zhǎng)就會(huì)遇到困難，甚至還會(huì)死亡。這是因?yàn)槌松L(zhǎng)需要能量以外，細(xì)菌還需要能量來(lái)維持它的生存。這種能量稱為維持能。
（4）氧氣
按照微生物對(duì)氧氣的需要情況，可將它們分為以下五個(gè)類型。
a. 需氧微生物：這類微生物需要氧氣供呼吸之用，有氧氣，便不能生長(zhǎng)。但是高濃度的氧氣對(duì)需氧微生物也是有毒的，很多需氧微生物不能在氧氣濃度大于大氣中氧氣濃度的條件下生長(zhǎng)。絕大多數(shù)微生物都屬于這個(gè)類型。
b. 兼性需氧微生物：這類微生物在有氧氣存在或無(wú)氧氣存在情況下，都能生長(zhǎng)，只不過所進(jìn)行的代謝途徑不同罷了。在無(wú)氧氣存在的條件下，它進(jìn)行發(fā)酵作用，例如酵母菌的無(wú)氧乙醇發(fā)酵。
c. 微量需氧微生物：這類菌是需要氧氣的，但只在0.2大氣壓下生長(zhǎng)-好。這可能是由一它們含有在強(qiáng)氧化條件下失活的，因而只有在低壓下作用。
d. 耐氧微生物：這類微生物在生長(zhǎng)過程中，不需要氧氣，但也不怕氧氣存在，不會(huì)被氧氣所殺死。
e. 厭氧微生物：這類微生物在生長(zhǎng)過程中，不需要分子氧。分子氧存在對(duì)它們生長(zhǎng)產(chǎn)生毒害，不是被抑制，就是被殺死。
實(shí)驗(yàn)室微生物培養(yǎng)方法
根據(jù)培養(yǎng)時(shí)是否需要氧氣，可分為好氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)兩大類。
（1）好氧培養(yǎng)：也稱“好氣培養(yǎng)”。這種微生物在培養(yǎng)時(shí)，需要有氧氣加入，否則就不能生長(zhǎng)良好。
在實(shí)驗(yàn)室中，斜面培養(yǎng)是通過棉花塞從外界獲得無(wú)菌的空氣。
三角燒瓶液體培養(yǎng)多數(shù)是通過搖床振蕩，使外界的空氣源源不斷地進(jìn)入瓶中。
（2）厭氧培養(yǎng)：也稱“厭氣培養(yǎng)”。這類微生物在培養(yǎng)時(shí)，不需要氧氣參加。在厭氧微生物的培養(yǎng)過程中，重要的一點(diǎn)就是要除去培養(yǎng)基中的氧氣。
一般可采用下列幾種方法：
a.降低培養(yǎng)基中的氧化還原電λ：常將還原劑如谷胱甘肽、硫基醋酸鹽等，加入到培養(yǎng)基中，便可達(dá)到目的。有的將一些動(dòng)物的死的或活的組織如牛心、羊腦加入到培養(yǎng)基中，也可適合厭氧菌的生長(zhǎng)。
b.化合去氧：這也有很多方法，主要有：用焦性食子酸吸收氧氣；用磷吸收氧氣；用好氧菌與厭氧混合培養(yǎng)吸收氧氣；用植物組織如發(fā)芽的種子吸收氧氣；用產(chǎn)生氫氣與氧化合的方法除氧。
c.隔絕阻氧：深層液體培養(yǎng)；用石蠟油封存；半固體穿刺培養(yǎng)。
d.替代驅(qū)氧：用二氧氣碳驅(qū)代氧氣；用氮?dú)怛?qū)代氧氣；用真空驅(qū)代氧氣；用氫氣驅(qū)代氧氣；用混和氣體驅(qū)代氧氣。
根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)，可分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)兩大類。
（1）固質(zhì)培養(yǎng)：是將菌種接至疏松而富有營(yíng)養(yǎng)的固體培養(yǎng)基中，在合適的條件下進(jìn)行微生物培養(yǎng)的方法。
（2）液體培養(yǎng)：在實(shí)驗(yàn)中，通過液體培養(yǎng)可以使微生物迅速繁殖，獲得大量的培養(yǎng)物，在一定條件下，還是微生物選擇增菌的有效方法。
微生物實(shí)驗(yàn)室常用菌種保藏法
菌種的保藏常采用干燥、低溫和隔絕空氣等措施，將其新陳代謝限制在-低范Χ內(nèi)，使其生命活動(dòng)處于半永-久性的休眠狀態(tài)，使菌種能夠存活、不污染雜菌、不發(fā)生或較少發(fā)生變異，保存菌種原有的各種生物學(xué)性狀。較常用的菌種保藏法有斜面或半固體傳代保藏法，以及冷凍真空干燥法和液氮超低溫保藏法。
1. 斜面或半固體傳代保藏法
此法保藏菌種常用的培養(yǎng)基有普通肉湯瓊脂斜面、血清斜面、血瓊脂斜面、雞蛋斜面和血清肉湯半固體培養(yǎng)基等等。
在斜面或半固體培養(yǎng)基表面，往往加入滅菌液體石蠟，用以隔絕空氣。此外，厭氧菌的傳代保藏則常采用瘡肉基。
2. 冷凍真空干燥法
將加入一定保護(hù)劑（如無(wú)菌脫脂牛奶）的菌種懸液冷凍，然后在凍結(jié)狀態(tài)下經(jīng)過真空干燥，使菌種處于半永-久性的休眠狀態(tài)，從而達(dá)到長(zhǎng)-久保藏的目的。一般可保藏?cái)?shù)年甚至數(shù)十年之久。該法需要特殊的低溫干燥設(shè)備。
3. 液氮超低溫保藏法
將保藏的菌種分散在保護(hù)劑中（如甘油、二甲亞楓、蔗糖和吐溫80等），或?qū)⑵桨迳仙L(zhǎng)良好的培養(yǎng)物打塊，原封不動(dòng)地置于保護(hù)劑中，預(yù)凍后保藏在液氮超低溫（-196℃）中。該法是目較理想的菌種保藏方法，可較長(zhǎng)-期保藏菌種。
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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